Detection of Cells and Viruses Using Synthetic Antibodies | 21

ABSTRACT

Saccharomyces cerevisiae ȏ͵͸Ȑ ‹• ‘•– ™‹†‡Ž› ‘™ „—††‹‰ ›‡ƒ•– ‘ˆ •‹œ‡ ȋͷȂ͹ ρȌ –Šƒ– Šƒ• „‡‡ „”‘ƒ†Ž› —•‡† ˆ‘” „‹‘Ž‘‰‹…ƒŽ ‘†‡Ž‹‰–‘•–—†›…‡ŽŽ”‡‰—Žƒ–‹‘’”‘…‡••‡•Ǥ ‡•‹†‡ …Žƒ••‹…ƒŽ ‡–Š‘†• ‘ˆ –Š‡‹” †‡–‡…–‹‘ǡ –Š‡”‡ ƒ”‡ •‡˜‡”ƒŽ methods used for yeast cells detection including optical and

‡Ž‡…–”‘…Š‡‹…ƒŽ –‡…Š‹“—‡•Ǥ –™‘Ǧ†‹‡•‹‘ƒŽ ϐŽ—‘”‡•…‡…‡ •’‡…–”‘•…‘’‹… ‡–Š‘† ȏ͵͹Ȑ Šƒ• „‡‡ ”‡’‘”–‡† ˆ‘” †‡–‡…–‹‘ ‘ˆ ›‡ƒ•–…‡ŽŽ•—•‹‰–Š‡‹–”‹•‹…ϐŽ—‘”‡•…‡…‡’”‘’‡”–‹‡•‘ˆ…‡ŽŽ•Ǥ‘‡ ‡Ž‡…–”‘…Š‡‹…ƒŽ •–—†‹‡• ȏ͵ͺǡ͵ͻȐ ƒ”‡ „ƒ•‡† ‘ ‡ƒ•—”‡‡– ‘ˆ †‹‡Ž‡…–”‹…˜ƒŽ—‡•‘ˆ›‡ƒ•–…‡ŽŽ•™Š‡‡š’‘•‡†–‘’ƒ”–‹…—Žƒ”•‘Ž˜‡–•Ǥ ”‡Žƒ–‹˜‡Ž›‡™‡–Š‘†ȏͶͲȐŠƒ•„‡‡’—„Ž‹•Š‡†ˆ‘”‘‹–‘”‹‰‘ˆ›‡ƒ•– …‡ŽŽ• —•‹‰ ‹’‡†ƒ…‡ •’‡…–”‘•…‘’‹… ƒ’’Ž‹…ƒ–‹‘•Ǥ Ž‡…–”‘…Š‡‹…ƒŽ ‹’‡†ƒ…‡ •’‡…–”‘•…‘’› ȏͶͳȐ Šƒ• „‡‡™‹†‡Ž› —•‡† ˆ‘” †‡•‹‰‹‰ ˜ƒ”‹‘—• „‹‘•‡•‘”•ǡ ƒ• ‹– ’”‘˜‹†‡• •‹‰‹ϐ‹…ƒ– ‹ˆ‘”ƒ–‹‘ ƒ„‘—– †‹ơ‡”‡– „‹‘Ǧ”‡…‘‰‹–‹‘ ‡˜‡–• –ƒ‹‰ ’Žƒ…‡ ‘ –Š‡ •—”ˆƒ…‡ ‘ˆ ‡Ž‡…–”‘†‡• „›‡ƒ•—”‹‰ …ƒ’ƒ…‹–ƒ…‡ …Šƒ‰‡•Ǥ Š‹• –‡…Š‹“—‡ Šƒ• „‡‡‡ơ‡…–‹˜‡Ž›—•‡†ˆ‘”›‡ƒ•–…‡ŽŽ•†‡–‡…–‹‘‹‘„‹Ž‹œ‡†‘•‡ŽˆǦ ƒ••‡„Ž‡†‘‘Žƒ›‡”ȋȌ‘ˆƒŽƒ‡–Š‹‘ŽǦ–”‡ƒ–‡†‰‘Ž†‡Ž‡…–”‘†‡ •—”ˆƒ…‡ǤŠ‡‹‘„‹Ž‹œ‡†›‡ƒ•–…‡ŽŽ•™‡”‡‹˜‡•–‹‰ƒ–‡†„› ƒ†‹ –Š‡‡ƒ™Š‹Ž‡…ƒ’ƒ…‹–‹˜‡ƒ†‡Ž‡…–”‘–”ƒ•ˆ‡””‡•‹•–‹˜‡’”‘’‡”–‹‡• ‘ˆ‡Ž‡…–”‘†‡•—”ˆƒ…‡™‡”‡ƒŽ•‘‘‹–‘”‡†ǤŠ‡”‡•—Ž–•‘„–ƒ‹‡†•Š‘™ ƒŽ‹‡ƒ””‡Žƒ–‹‘•Š‹’„‡–™‡‡‡Ž‡…–”‘–”ƒ•ˆ‡””‡•‹•–ƒ…‡˜ƒŽ—‡•™‹–Š Ž‘‰ƒ”‹–Š‹……‘…‡–”ƒ–‹‘‘ˆ›‡ƒ•–…‡ŽŽ•ǤŠ‡•›–Š‡–‹…ƒŽŽ›‘†‹ϐ‹‡† ’”‘˜‹†‡•”‡Žƒ–‹˜‡Ž›„‡––‡”‡Ž‡…–”‘…Š‡‹…ƒŽ•‡•‹‰•–”ƒ–‡‰›ˆ‘” ›‡ƒ•–…‡ŽŽ•ƒ††‡–‡…–‹‘ƒ–Ž‘™…‘…‡–”ƒ–‹‘Ž‡˜‡ŽǤ

—”ˆƒ…‡Ǧ‹’”‹–‡† ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ ȏͶʹȐ Šƒ• „‡‡ •—……‡••ˆ—ŽŽ› ƒ’’Ž‹‡†ˆ‘”ƒ•••‡•‹–‹˜‡†‡–‡…–‹‘‘ˆ›‡ƒ•–…‡ŽŽ•Ǥ‘Ž›—”‡–Šƒ‡ ‹• ƒ”‘„—•–ƒ†”‹‰‹†ƒ–‡”‹ƒŽ–Šƒ–‘–‘Ž›’”‘˜‹†‡••—‹–ƒ„Ž‡•‡•‹‰ ‹–‡”ˆƒ…‡„—–ƒŽ•‘…ƒ™‹–Š•–ƒ†Šƒ”•Š‡˜‹”‘‡–•ǤSaccharomyces cerevisiae coated glass slides are used as stamping material to cast –Š‡ …‡ŽŽ ‹’”‡••‹‘• ‘ ’”‡Ǧ’‘Ž›‡”‹œ‡† •—”ˆƒ…‡ ‘ˆ ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡Ǥ Š‡ …‘’‘•‹–‹‘‘ˆ‘‘‡” ƒ† …”‘••ǦŽ‹‡” …ƒ„‡ ƒ†Œ—•–‡† ‹ ‘”†‡”–‘ƒ…Š‹‡˜‡”‡˜‡”•‹„‹Ž‹–›ǤŠ‡ˆ‘”…‡•‘’‡”ƒ–‹‰„‡–™‡‡ƒƒŽ›–‡ ƒ†‹’”‹–‡†•—”ˆƒ…‡ƒ”‡„ƒ•‡†‘‘Ǧ…‘˜ƒŽ‡–‹–‡”ƒ…–‹‘••—…Š ƒ•Š›†”‘‰‡„‘†‹‰ǡ˜ƒ†‡”ƒƒŽ•ˆ‘”…‡•ƒ†•‘‡Š›†”‘’Š‘„‹… ‹–‡”ƒ…–‹‘•ƒ•™‡ŽŽƒ”‡…”‡ƒ–‡††—”‹‰•–ƒ’‹‰’”‘…‡••Ǥ‡•‹‰‡† ‹’”‹–‡†…ƒ˜‹–‹‡•’‘••‡••ƒŽŽ ˆ—…–‹‘ƒŽ’”‘’‡”–‹‡• ‹…Ž—†‹‰•‹œ‡ǡ •Šƒ’‡ǡ ƒ† †‹‡•‹‘•Ǥ ‹ƒ‰‡ ‘ˆ S. cerevisiae imprinted •—”ˆƒ…‡ ”‡˜‡ƒŽ –Š‡ ”‡…‘‰‹–‹‘ …ƒ˜‹–‹‡• ’ƒ––‡”‡† —‹ˆ‘”Ž› ‘ ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ Žƒ›‡”Šƒ•„‡‡•Š‘™ ‹ ‹‰Ǥͳ͸Ǥ͵ǤŠ‡•‡ ‹–‡”ƒ…–‹‘ •‹–‡• ’”‘˜‹†‡ ”‡˜‡”•‹„Ž‡ ”‡Ǧ‹…Ž—•‹‘ ˆ‘” ›‡ƒ•– …‡ŽŽ• ƒ† †‘ ‘– —†‡”‰‘ƒ›•–”—…–—”ƒŽ†‹•–‘”–‹‘™Š‡–‡’Žƒ–‡Ž‡ƒ˜‡•–Š‡•—”ˆƒ…‡Ǥ

’”‹–‡† ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ •—”ˆƒ…‡• …ƒ „‡ …‘—’Ž‡† ™‹–Š ƒ•• •‡•‹–‹˜‡†‡˜‹…‡• •—…Šƒ• –‘ ‡•–ƒ„Ž‹•Š •ƒ”–„‹‘•‡•‘”• ȏͶ͵ȐǤ ‡ƒ•—”‡‡–’‡”ˆ‘”‡†‘ͳͲœ†—ƒŽ‡Ž‡…–”‘†‡†‡˜‹…‡‡šŠ‹„‹– ƒ •—‹–ƒ„Ž‡ •‡•‘” ”‡•’‘•‡ ˆ‘” S. cerevisiae cells of concentration ͳ‰ȀǤ‘Ǧ‹’”‹–‡† …Šƒ‡Ž™‘”• ƒ• ”‡ˆ‡”‡…‡ –Šƒ– ‡šŠ‹„‹– ‡‰Ž‹‰‹„Ž‡ ‡ơ‡…–ǡ ‹Ǥ‡Ǥ ͹Ͳ œǤ ”‘••Ǧ•‡•‹–‹˜‹–› •–—†‹‡• •—‰‰‡•– ƒ

”‡Žƒ–‹˜‡Ž›—…ŠŠ‹‰Š‡”‡–•‡•‘”•‹‰ƒŽǡ‹Ǥ‡ǤͺͲͷœˆ‘”S. cerevisiae compared to the response of Saccharomyces bayanusǡ ™Š‹…Š ™ƒ• ƒ”‘—†͵ͳͲœƒ––Š‡•ƒ‡…‘…‡–”ƒ–‹‘Ž‡˜‡ŽǤŠ‡…”‘••Ǧ•‡•‹–‹˜‹–› ”‡•—Ž– Šƒ• „‡‡ †‡‘•–”ƒ–‡† ‹ ‹‰Ǥ ͳ͸ǤͶ ‹†‹…ƒ–‹‰ –Šƒ– •‡•‘” ”‡•’‘•‡ ‹• •—„•–ƒ–‹ƒŽŽ› Š‹‰Š‡” –Šƒ‘–Š‡” ›‡ƒ•– •’‡…‹‡ǡ ƒŽ–Š‘—‰Š „‘–Š Šƒ˜‡ …Ž‘•‡Ž› ”‡Žƒ–‡† •‹œ‡ †‹‡•‹‘•Ǥ Š‡ ’ƒ––‡”‡† •—”ˆƒ…‡ •–”—…–—”‡‘ˆ‹’”‹–‡†Žƒ›‡”•‡Ž‡…–‹˜‡Ž›ƒ……‘‘†ƒ–‡•S. cerevisiae in comparison to S. bayanusǤ

Š‹• •‡•‘” •‡–—’ Šƒ• ƒŽ•‘ „‡‡ ’”‘˜‡ ˜‡”› ˜ƒŽ—ƒ„Ž‡ ˆ‘” ‘‹–‘”‹‰‘’–‹ƒŽ…‘†‹–‹‘•ȏͶͶȐˆ‘”…‡ŽŽ‰”‘™–Šƒ†’”‘’ƒ‰ƒ–‹‘ ‘‹’”‹–‡†’‘Ž›‡”•—”ˆƒ…‡ǤŠ‡•‡ϐ‹†‹‰•…‘—Ž†„‡—•‡ˆ—Ž–‘…ƒ””› ‘—– ˆ—†ƒ‡–ƒŽ •–—†‹‡• ƒ„‘—– …Šƒ”ƒ…–‡”‹•–‹…• ‘ˆ ‹…”‘‘”‰ƒ‹•• ƒ† ’”‘…‡••Ǧ…‘–”‘Ž ƒ’’Ž‹…ƒ–‹‘•Ǥ Š‡ ‹’”‹–‡† ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ Žƒ›‡”™ƒ•‡š’‘•‡†–‘†‹ơ‡”‡–…‘…‡–”ƒ–‹‘•‘ˆ‹†‹˜‹†—ƒŽ—–”‹‡– solutions and corresponding duplication of yeast cells in a particular

–‹‡ ˆ”ƒ‡™ƒ•‘‹–‘”‡†Ǥ ‹”•–ǡ †‹ơ‡”‡– ‰Ž—…‘•‡ …‘…‡–”ƒ–‹‘• •–ƒ”–‹‰ˆ”‘Ͳ–‘ͷͲ‰Ȁƒ–…‘•–ƒ––‡’‡”ƒ–—”‡ǡ‹Ǥ‡Ǥ͵Ͳι™‡”‡

’ƒ••‡†–Š”‘—‰Š–Š‡‡ƒ•—”‹‰†‡˜‹…‡ƒ†…‡ŽŽ‰”‘™–Š™ƒ•‘„•‡”˜‡†Ǥ Ž—…‘•‡Ž‡˜‡Žƒ–ͳͲ‰Ȁ™ƒ•ˆ‘—†–‘„‡„‡•–ƒ–™Š‹…Š…‡ŽŽ…—Ž–—”‡ ”‡†—’Ž‹…ƒ–‡ ‹͵ͷŠǤ ‹‹Žƒ”Ž›ǡ†‹ơ‡”‡–’‡”…‡–ƒ‰‡•‘ˆ ƒ‘‹— •—Žˆƒ–‡ •‘Ž—–‹‘™‡”‡ƒŽ•‘‘‹–‘”‡† ˆ‘”Š‹‰Š‡•– …‡ŽŽ ‰”‘™–Š ”ƒ–‡• ™Š‹…Š…‘‡‘—––‘„‡ʹΨƒˆ–‡”ʹ͸ŠǤ Š‡ ˜ƒ”›‹‰ Žƒ›‡” Š‡‹‰Š–• ‘ˆ ‹’”‹–‡† ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ ϐ‹Ž …‘ƒ–‡† ‘ †‡˜‹…‡ ‹ϐŽ—‡…‡ –Š‡ ”‡˜‡”•‹„‹Ž‹–› ‘ˆ –Š‡ •—”ˆƒ…‡Ǥ š’‡”‹‡–ƒŽŽ›ǡ‹–Šƒ•„‡‡‘„•‡”˜‡†–Šƒ–‹ˆ–Š‡Žƒ›‡”Š‡‹‰Š–‹•”ƒ‹•‡† —’ –‘ ͳǤͷ ρ –Š‡ ’‘Ž›‡” •—”ˆƒ…‡ ‘ˆ ‹–‡”ƒ…–‹‘ „‹†• ›‡ƒ•– …‡ŽŽ• ‹””‡˜‡”•‹„Ž›ǤŠ‹•„‡Šƒ˜‹‘”™ƒ•‡š’Ž‘‹–‡†ˆ‘”•–—†›‹‰‘•‘–‹…‡ơ‡…–• ƒ†–Š—•…‘ŽŽ‡…–‹‰‹ˆ‘”ƒ–‹‘ƒ„‘—––Š‡‡˜‹”‘‡–ƒŽ…‘†‹–‹‘ ‘ˆ …‡ŽŽ ”‡’”‘†—…–‹‘Ǥ Š‡ ‡…Šƒ‹…ƒŽ •–ƒ„‹Ž‹–› ‘ˆ –Š‡ ‹’”‹–‡† ’‘Ž›‡”ƒ‡’‘••‹„Ž‡‘ˆŽ‘‰Ǧ–‡”ƒƒŽ›•‹•™‹–Š‘—–†‡–‡”‹‘”ƒ–‹‰ –Š‡ Žƒ›‡”ƒ–‡”‹ƒŽǤŠ‹•ƒ•’‡…– ‹•„‡‡ϐ‹…‹ƒ”› ˆ‘”†‡•‹‰‹‰ ”—‰‰‡† Žƒ›‡”•ˆ‘”†‡˜‡Ž‘’‹‰•‡•‘”•‘ˆŽ‘‰Ž‹ˆ‡ƒ†…‘–‹—‘—•‘‹–‘”‹‰ ‹…‘’ƒ”‹•‘–‘ƒ–—”ƒŽƒ–‹„‘†›…‘ƒ–‹‰•Ǥ ‘ ˆƒ”ǡ –Š‡ •—”ˆƒ…‡Ǧ‹’”‹–‡† ’‘Ž›‡”• Šƒ˜‡ •Š‘™ ƒ Ž‘– ‘ˆ …Šƒ”ƒ…–‡”ƒ†ƒ–—”‹–›‹‘–‘Ž›†‡•‹‰‹‰•‡•‹–‹˜‡ƒ†•‡Ž‡…–‹˜‡ ƒ–‡”‹ƒŽ• ˆ‘” ›‡ƒ•– …‡ŽŽ• „—– ƒŽ•‘ ‡˜ƒŽ—ƒ–‹‰ –Š‡ ‘’–‹ƒŽ ‰”‘™–Š …‘†‹–‹‘•Ǥ ‡…‡– •–—†‹‡• ȏͶͷȐ Šƒ˜‡ •Š‘™ –Šƒ– –Š‡•‡ ƒ–”‹…‡• …ƒƒŽ•‘„‡ƒ’’Ž‹‡†ˆ‘”‘‹–‘”‹‰…‡ŽŽ•–ƒ‰‡•ǡ‹Ǥ‡Ǥ•‹‰Ž‡ƒ††—’Ž‡š …‡ŽŽ•ǤŠ‡”‡’”‘†—…–‹‘‘ˆ›‡ƒ•–…‡ŽŽ• –ƒ‡•’Žƒ…‡ ‹•‡˜‡”ƒŽ’Šƒ•‡• ƒ† †—”‹‰ –Š‹• …‘—”•‡ –Š‡ •‹œ‡ ƒ† •Šƒ’‡ ‘ˆ –Š‡ …‡ŽŽ• †‘‡• ‘– ”‡ƒ‹ •ƒ‡ǤŠ‡ ”‡’”‘†—…–‹‘ •–ƒ‰‡‘ˆ ‹†‹˜‹†—ƒŽ ›‡ƒ•– …‡ŽŽ• …ƒ „‡‘‹–‘”‡†„›‹’”‹–‡†•—”ˆƒ…‡ƒ•–Š‡…ƒ˜‹–‹‡•’ƒ––‡”‘•—”ˆƒ…‡ •–ƒ› —†‹•–—”„‡†Ǥ Š‹• •–—†› …ƒ „‡ …‘†—…–‡† „› •›–Š‡•‹œ‹‰ –™‘†‹ơ‡”‡–•‡•‘”Žƒ›‡”•‹’”‹–‡†™‹–Š•‹‰Ž‡ƒ††—’Ž‡š…‡ŽŽ•ǡ ”‡•’‡…–‹˜‡Ž›ǤŠ‡•—”ˆƒ…‡‘ˆ•‹‰Ž‡ƒ††—’Ž‡š…‡ŽŽ•‹’”‹–‡†’‘Ž›‡” •—”ˆƒ…‡ …ƒ „‡ …Šƒ”ƒ…–‡”‹œ‡† „› ƒ† –Š‡ •—„Œ‡…–‡† –‘ƒ•• •‡•‹–‹˜‡‡ƒ•—”‡‡–•Ǥ• •Š‘™ ‹ ‹‰Ǥ ͳ͸Ǥͷ ‹– …Ž‡ƒ”Ž› ‹†‹…ƒ–‡• –Šƒ––™‘†‹ơ‡”‡–Ž›‹’”‹–‡†•—”ˆƒ…‡•‡šŠ‹„‹–—…ŠŠ‹‰Š‡”•‡•‘” •‹‰ƒŽ• –‘™ƒ”†• –Š‡ –‡’Žƒ–‡†›‡ƒ•– …‡ŽŽ• ƒ• …‘’ƒ”‡ –‘‘–Š‡”• ƒ– •ƒ‡…‘…‡–”ƒ–‹‘Ž‡˜‡ŽǤŠ‡•—”ˆƒ…‡‰‡‘‡–”›‘ˆ‹’”‹–‡†’‘Ž›‡” Žƒ›‡”’”‘˜‹†‡••‡Ž‡…–‹˜‹–›ƒ• ‹–†‘‡•‘–ƒŽŽ‘™–Š‡ ‹…‘”’‘”ƒ–‹‘‘ˆ ‘–Š‡”›‡ƒ•–…‡ŽŽ•–Šƒ–ƒ”‰‡–‡†ƒƒŽ›–‡•Ǥ–‡”‡•–‹‰Ž›ǡ–Š‡”‡•’‘•‡ –‹‡‘ˆ •‡•‘”ƒŽ•‘†‹ơ‡”‡–‹ƒ–‡„‡–™‡‡ ‹’”‹–‡† –‡’Žƒ–‡ ƒ†‘–Š‡”…‘–‡†‹‰›‡ƒ•–…‡ŽŽ•ǤŠ‡”‡•’‘•‡–‹‡‘ˆ–‡’Žƒ–‡…‡ŽŽ• ƒ”‡—…ŠŠ‹‰Š‡”™Š‹…Š‹†‹…ƒ–‡•–Šƒ––Š‡‘Ǧ•’‡…‹ϐ‹…„‹†‹‰•–ƒ‡ •Š‘”––‹‡•’ƒ•Ǥ

Š‹••–—†›‹•˜ƒŽ—ƒ„Ž‡‹–‡”•‘ˆ†‡•‹‰‹‰ƒ—Ž–‹Ǧ•‡•‘”ƒ””ƒ› …ƒ’ƒ„Ž‡‘ˆ”‡…‘‰‹œ‹‰–™‘†‹ơ‡”‡–…‡ŽŽ•’‡…‹‡••‹—Ž–ƒ‡‘—•Ž›ƒ– ƒ •‹‰Ž‡ •‡•‹‰ ’Žƒ–ˆ‘”’”‘˜‹†‡†™‹–Š ‡Šƒ…‡† •‡•‹–‹˜‹–› ƒ† •‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ –‡–”ƒ ‡Ž‡…–”‘†‡—Ž–‹Ǧ…Šƒ‡Ž ™ƒ• †‡•‹‰‡† ‘ ™Š‹…Š–™‘†‹ơ‡”‡–Ž›‹’”‹–‡†Žƒ›‡”•ǡ‹Ǥ‡Ǥ•‹‰Ž‡ƒ††—’Ž‡š›‡ƒ•– …‡ŽŽ• ƒŽ‘‰ ™‹–Š –Š‡ –™‘ ‘Ǧ‹’”‹–‡† Žƒ›‡”• ™‡”‡ …‘ƒ–‡†Ǥ Š‹• —Ž–‹Ǧ•‡•‘” †‡˜‹…‡ Šƒ• ’”‘˜‡ ˜‡”› •—……‡••ˆ—Ž ‹ ‰‡––‹‰ •‡•‘” ”‡•’‘•‡•ˆ‘”ƒŽŽˆ‘—”Žƒ›‡”•™‹–Š‘—–ƒ›•‡”‹‘—•‘‹•‡ǡ†”‹ˆ–‘”…”‘••Ǧ –ƒŽ’”‘„Ž‡•‘ˆ •‹‰ƒŽ•ǤŠ‡ ”‘„—•–ǡ Ž‘™Ǧ…‘•–‹‹ƒ–—”‹œ‡†—Ž–‹Ǧ •‡•‘” ƒ””ƒ› Šƒ• ˜‡”› „”‹‰Š– ƒ† ’”‘‹•‹‰ ˆ—–—”‡ ‹ †‡˜‡Ž‘’‹‰ •ƒ”–„‹‘•‡•‘”•ƒ†‹„‹‘–‡…Š‘Ž‘‰›Ǥ

Ž–Š‘—‰Š Š—ƒ „Ž‘‘† …‡ŽŽ• …ƒ „‡ †‹˜‹†‡† ‹–‘ –Š”‡‡ †‹ơ‡”‡– …ƒ–‡‰‘”‹‡•ǡƒ‡Ž›”‡†„Ž‘‘†…‡ŽŽ• ȋȌǡ™Š‹–‡„Ž‘‘†…‡ŽŽ• ȋȌ ƒ†’Žƒ–‡Ž‡–•ǢŠ‘™‡˜‡”ǡǡ ‹Ǥ‡Ǥ‡”›–Š”‘…›–‡• ‹• –Š‡‘•–…‘‘ …Žƒ••‘ˆ„Ž‘‘†…‡ŽŽ•Ǥ•–Š‡ƒ‹ˆ—…–‹‘‘ˆ‹•–‘…ƒ””›‘š›‰‡ ‹ –Š‡ „Ž‘‘† „—– ‹–‡”‡•–‹‰Ž› –Š‡› ƒŽ•‘ …‘–ƒ‹ –Š‡ ‹ˆ‘”ƒ–‹‘ ƒ„‘—– –Š‡ ABO „Ž‘‘† ‰”‘—’ •›•–‡ǡ ‹Ǥ‡Ǥ Aǡ Bǡ AB and OǤ Ž‘‘† –”ƒ•ˆ—•‹‘ ‹•†‘‡„›ƒ–…Š‹‰ –Š‡„Ž‘‘†‰”‘—’•‘ˆ’ƒ–‹‡–•ƒ† †‘‘”•‹Š‘•’‹–ƒŽ•ǤŠ‡…‘””‡…–ƒ–…Š‹‰‹•˜‡”›‹’‘”–ƒ–‹„Ž‘‘†

–”ƒ•ˆ—•‹‘ ‘–Š‡”™‹•‡ ‹•ƒ–…Š‹‰ ‘ˆ „Ž‘‘† ‰”‘—’• …ƒ Ž‡ƒ† –‘ •‡”‹‘—• Š‡‘Ž›–‹… ’”‘„Ž‡•Ǥ ‡‡”ƒŽŽ› ‹ …Ž‹‹…ƒŽ Žƒ„‘”ƒ–‘”‹‡• –Š‡ †‡–‡…–‹‘‘ˆ„Ž‘‘†‰”‘—’•‹•†‘‡„›–”‡ƒ–‹‰–Š‡„Ž‘‘†•ƒ’Ž‡™‹–Š †‡š–”ƒ‰‡Ž–Šƒ–…‘–ƒ‹••’‡…‹ϐ‹…ƒ–‹„‘†‹‡•ƒ†—’‘‹–‡”ƒ…–‹‘‹– ˆ‘”•’”‡…‹’‹–ƒ–‹‘‹†‹…ƒ–‹‰–Š‡–›’‡‘ˆ„Ž‘‘†‰”‘—’Ǥ ‹‡œ‘‡Ž‡…–”‹… ‹—‘•‡•‘”• ȏͶ͸Ȑ Šƒ˜‡ „‡‡ †‡˜‡Ž‘’‡† ˆ‘” †‡–‡…–‹‘‘ˆ‡”›–Š”‘…›–‡•„›—•‹‰ƒ–‹„‘†›”‡…‘‰‹–‹‘‡…Šƒ‹•Ǥ Š‡‹…ƒŽŽ› •‡•‹–‹˜‡ ‹–‡”ˆƒ…‡ ‘ˆ –Š‹• ƒ–‡”‹ƒŽ …‘’”‹•‡• ’‘Ž›‡–Š›Ž‡‡‹‹‡Ǧƒ–‹Ǧ‰Ž›…‘’Š‘”‹ A ƒ–‹„‘†› …‘ƒ–‡† ‘ ‰‘Ž† ‡Ž‡…–”‘†‡‘ˆ’‹‡œ‘‡Ž‡…–”‹…•—„•–”ƒ–‡ǤŠ‡†‡•‹‰‡†•‡•‘”ˆ‘”Š—ƒ „Ž‘‘† ‡”›–Š”‘…›–‡• ‡šŠ‹„‹– …‘•‹†‡”ƒ„Ž‡ •–ƒ„‹Ž‹–› ƒ† –Š—• …ƒ „‡ —•‡† ˆ‘” •‡˜‡”ƒŽ ƒƒŽ›•‹•Ǥ Š‡ Š‹‰Š •–ƒ„‹Ž‹–› ‘ˆ –Š‡ …‘ƒ–‡† †‡˜‹…‡ ƒ‡• •–‘”ƒ‰‡ …ƒ’ƒ…‹–› ‘˜‡” ͳͲ ™‡‡• ƒ† ‘”‡ ‡˜‡ ƒ– ”‘‘ –‡’‡”ƒ–—”‡…‘†‹–‹‘•ǤŠ‡”‡‰‡‡”ƒ–‹‘‡–Š‘†‹•ƒŽ•‘•‹‰‹ϐ‹…ƒ– –Šƒ–”‡‘˜‡•–Š‡„‘—†‡†ƒ–‹‰‡ƒ†ƒŽ•‘ƒ˜‘‹†•–Š‡Žƒ›‡”ƒ–‡”‹ƒŽ ˆ”‘…Š‡‹…ƒŽ‡ơ‡…–•Ǥ ‘‡ ‘’–‹…ƒŽ –‡…Š‹“—‡• •—…Š ƒ• •—”ˆƒ…‡ ’Žƒ•‘ ”‡•‘ƒ…‡ ȋȌŠƒ˜‡ƒŽ•‘„‡‡—•‡†ˆ‘”‘‹–‘”‹‰–Š‡…‡ŽŽ Ž‹‰ƒ†”‡ƒ…–‹‘• ‘•—”ˆƒ…‡Ǥ‡…‡–Ž›ǡ•‡•‘”ȏͶ͹Ȑ‹•†‡•‹‰‡†ˆ‘”„Ž‘‘†‰”‘—’• †‡–‡…–‹‘ ‹ ‡ƒ” ‹ˆ”ƒ”‡† ”‡‰‹‘Ǥ Š‡ •‡•‘” †‡•‹‰ …‘•‹•– ‘ˆ ƒ ‰Žƒ•••—„•–”ƒ–‡‘™Š‹…Š‰‘Ž†Žƒ›‡”‹•†‡’‘•‹–‡†ǡ™Š‹…Š‹•…‘˜‡”‡†„› ƒ„—ơ‡”Žƒ›‡”ƒ†ϐ‹ƒŽŽ›‘–Š‹•„—ơ‡”•—”ˆƒ…‡ƒ–Š‹ϐ‹Ž‘ˆ„Ž‘‘† •ƒ’Ž‡‹•†‡’‘•‹–‡†Ǥ‘Žƒ”‹œ‡†Ž‹‰Š–‘ˆ’ƒ”–‹…—Žƒ”™ƒ˜‡Ž‡‰–Šƒ†‡ –‘ˆƒŽŽ‘•—„•–”ƒ–‡•—”ˆƒ…‡ƒ†–Š‡”‡•—Ž–‹‰”‡ϐŽ‡…–ƒ…‡‹•‡ƒ•—”‡†Ǥ Š‡Žƒ–‡•–‡“—‹’‡–ˆ‘”†‡–‡…–‹‘’—”’‘•‡‹•„ƒ•‡†‘Žƒ•‡”„‡ƒ ”‡ϐŽ‡…–ƒ…‡–‘‘‹–‘”–Š‡•‡•—”ˆƒ…‡”‡ƒ…–‹‘•™‹–Šƒ–‹‰‡•Ǥ ’ƒ”–ˆ”‘ƒ„‘˜‡‡–‹‘‡††‡–‡…–‹‘•–”ƒ–‡‰‹‡•‘ˆ‡”›–Š”‘…›–‡•ǡ •—”ˆƒ…‡ ‹’”‹–‹‰ …ƒ ƒŽ•‘ „‡ ƒ’’Ž‹‡† ˆ‘” „Ž‘‘† ‰”‘—’ †‡–‡…–‹‘Ǥ ‘” –Š‹• ’—”’‘•‡ ‡”›–Š”‘…›–‡ •–ƒ’• ™‡”‡ ƒ†‡ „› †‡’‘•‹–‹‰ –Š‡…‡ŽŽ•‘•‹Ž‹…‘•—”ˆƒ…‡ƒ†–Š—•–Š‹• ‹’”‡••‹‘…ƒ„‡…ƒ•–‡† ‘ ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ Žƒ›‡” ‘ˆ ƒ’’”‘’”‹ƒ–‡ –Š‹…‡••Ǥ Š‡ ‹’”‹–‹‰ ‘ˆ ‡”›–Š”‘…›–‡• ‘ ’‘Ž›‡” •—”ˆƒ…‡ …ƒ „‡ …Šƒ”ƒ…–‡”‹œ‡† „› ƒ• •Š‘™ ‹ ‹‰Ǥ ͳ͸Ǥ͸Ǥ ’”‡Ž‹‹ƒ”› •–—†‹‡• ȏͶͺȐǡ –™‘ †‹ơ‡”‡– ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ Žƒ›‡”• ™‡”‡ ‹’”‹–‡† ™‹–Š „Ž‘‘† ‰”‘—’ A and B, ”‡•’‡…–‹˜‡Ž›ǡƒ†’—–—†‡”ƒ•••‡•‹–‹˜‡‡ƒ•—”‡‡–•‘ͳͲœ ǤŠ‡ •‡•‘” ”‡•’‘•‡•‘ˆ –Š‡•‡ –™‘ Žƒ›‡”• ‹†‹…ƒ–‡ –Šƒ– –Š‡› ’”‡ˆ‡” –‘ „‹† •‡Ž‡…–‹˜‡Ž› –ƒ”‰‡– „Ž‘‘† ‰”‘—’ ‹ ’”‡•‡…‡ ‘ˆ ‘–Š‡” …‘’‡–‹‰„Ž‘‘†‰”‘—’Ǥ ‘”‡šƒ’Ž‡’‘Ž›—”‡–Šƒ‡Žƒ›‡”‹’”‹–‡† ™‹–Š„Ž‘‘†‰”‘—’A •Š‘™•ƒ„‘—–͵–‹‡•Š‹‰Š‡”•‹‰ƒŽ –Šƒ„Ž‘‘† group Bƒ––Š‡•ƒ‡…‘…‡–”ƒ–‹‘Ǥ’”‹–‹‰’”‘…‡••’”‘†—…‡••‹œ‡

•‡•‹–‹˜‡ •—”ˆƒ…‡ …ƒ˜‹–‹‡•™Š‹…Š’”‘˜‹†‡„‡•– ϐ‹––‹‰ ‘Ž› –‘ –ƒ”‰‡– ƒƒŽ›–‡•ǡ ‹Ǥ‡Ǥ —•‡† †—”‹‰ ‹’”‹–‹‰Ǥ –Š‹• …ƒ•‡ –Š‡ ‰‡‘‡–”‹…ƒŽ •Šƒ’‡‘ˆ–Š‡…‡ŽŽ•‹•ƒŽ‘•–•‹‹Žƒ”ǡ•‘•‡Ž‡…–‹˜‹–›…ƒ„‡ƒ…Š‹‡˜‡†„› ‘Ǧ…‘˜ƒŽ‡–‹–‡”ƒ…–‹‘•„‡–™‡‡ƒƒŽ›–‡ƒ†•—”ˆƒ…‡Ǥ•–Š‡ ‘—–‡”…‡ŽŽ‡„”ƒ‡•‘ˆ†‹ơ‡”‡–„Ž‘‘†‰”‘—’•…‘•‹•–‘ˆ†‹ơ‡”‡– •—‰ƒ”‘Ž‡…—Ž‡•–Šƒ–†‡˜‡Ž‘’Š›†”‘‰‡„‘†‹‰‡–™‘”•™‹–Š–Š‡ Š›†”‘š›Ž ‰”‘—’• ‘ˆ ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ Žƒ›‡”Ǥ Š‹• ’”‘˜‹†‡• ”‡…‘‰‹–‹‘ ’”‘’‡”–‹‡•ˆ‘”ƒ’ƒ”–‹…—Žƒ”–›’‡‘ˆ„Ž‘‘†‰”‘—’ƒ†–Š—•‰‡‡”ƒ–‹‰ •‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ•–Š‡”‡Ǧ‹…Ž—•‹‘‘ˆ–Š‡…‡ŽŽ•‘’‘Ž›‡”•—”ˆƒ…‡‹•ˆ—ŽŽ› ”‡˜‡”•‹„Ž‡ǡ•‘†‡–‡…–‹‘…ƒ„‡ƒ†‡•‡˜‡”ƒŽ–‹‡•Ǥ

Š‡•—……‡••ˆ—Ž‹’”‹–‹‰•–”ƒ–‡‰›ˆ‘”„Ž‘‘†‰”‘—’•A and B™ƒ• ˆ—”–Š‡”‹˜‡•–‹‰ƒ–‡†ȏͶͻȐƒ†ƒ’’Ž‹‡†–‘‘–Š‡”„Ž‘‘†‰”‘—’•ǡ‹Ǥ‡ǤAB and OǤ‰‡‡”ƒŽˆ‘—”†‹ơ‡”‡–’‘Ž›—”‡–Šƒ‡Žƒ›‡”•™‡”‡•›–Š‡•‹œ‡† ‹’”‹–‡† ™‹–Š „Ž‘‘† ‰”‘—’• Aǡ Bǡ AB, and O, ”‡•’‡…–‹˜‡Ž›Ǥ Š‡ ”‡Žƒ–‹˜‡ •‡•‘” ”‡•’‘•‡ ‘ˆ ‡ƒ…Š Žƒ›‡”™ƒ• †‡–‡”‹‡† ˆ‘” ƒŽŽ –Š‡ ˆ‘—” ƒƒŽ›–‡• ƒ• †‡•…”‹„‡† ‹ ‹‰Ǥ ͳ͸Ǥ͹ ƒ† –Š—• …”‘••Ǧ•‡•‹–‹˜‹–› –”‡†…ƒ„‡‘„•‡”˜‡†Ǥ

From the graph it is clear that each layer responds highest sensor

•‹‰ƒŽ ˆ‘” –Š‡ ˜‡”› •ƒ‡ „Ž‘‘† ‰”‘—’ –Šƒ– ™ƒ• —•‡† ƒ• –‡’Žƒ–‡ †—”‹‰ ‹’”‹–‹‰ ’”‘…‡••Ǥ Š‡ •‡•‘” ”‡•’‘•‡ ‘ˆ ƒ ’ƒ”–‹…—Žƒ” ‹’”‹–‡† ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ Žƒ›‡” ‹• “—‹–‡ ‹–‡”‡•–‹‰ –‘™ƒ”†• ‘–Š‡” „Ž‘‘†‰”‘—’•–Šƒ–Š‡–ƒ”‰‡–‡†‘‡Ǥƒ”Ž‹‡”‹–Šƒ•„‡‡‡–‹‘‡† –Šƒ– –Š‡ ‹’”‹–‡† …ƒ˜‹–‹‡• †‘ ‘– ’”‘˜‹†‡ •‡Ž‡…–‹˜‹–› ƒ• –Š‡ •‹œ‡ ‘ˆ ƒŽŽ „Ž‘‘† …‡ŽŽ• ‹• ƒŽ‘•– ‹†‡–‹…ƒŽǤ Š‡†‹ơ‡”‡…‡ ‹ –Š‡ •—”ˆƒ…‡

’”‘’‡”–‹‡•‘ˆ„Ž‘‘†…‡ŽŽ•Šƒ•†‹ơ‡”‡–ƒˆϐ‹Ž‹ƒ–‹‘•™‹–Š’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ ‹–‡”ˆƒ…‡Ǥ ‘”‡šƒ’Ž‡‹–Š‡…ƒ•‡‘ˆ„Ž‘‘†‰”‘—’OǦ‹’”‹–‡†Žƒ›‡”ǡ –Š‡”‡•’‘•‡‘ˆ„Ž‘‘†‰”‘—’B‹•“—‹–‡Š‹‰Šƒ•…‘’ƒ”‡–‘„Ž‘‘†‰”‘—’ A and ABǤŠ‹•‹•†—‡–‘–Š‡ˆƒ…––Šƒ––Š‡O-antigen sites present on ‡„”ƒ‡ •—”ˆƒ…‡ƒ”‡—’ –‘ͷͲΨ‘ˆ„Ž‘‘†‰”‘—’BǤ—‹–‡ •‹‹Žƒ” „‡Šƒ˜‹‘”…ƒ„‡‘„•‡”˜‡† ‹ˆ™‡–ƒ‡–Š‡•‡•‘””‡•’‘•‡‘ˆ„Ž‘‘† group BǦ‹’”‹–‡†Žƒ›‡”ˆ‘”„Ž‘‘†‰”‘—’OǤ‘ǡˆ”‘–Š‹••–—†›‹–…ƒ „‡…‘…Ž—†‡†–Šƒ–…‡ŽŽƒ–‹‰‡”‡…‘‰‹–‹‘’”‘’‡”–‹‡•ƒ”‡‹†—…‡†„› Š›†”‘‰‡„‘†‹‰‘–„›–Š‡‹’”‹–‡†…ƒ˜‹–›•‹œ‡Ǥ

‡…‡– •›–Š‡–‹… ƒ’’”‘ƒ…Š ȏͷͲȐ ›‹‡Ž†• ƒ•–‘‹•Š‹‰Ž› Š‹‰Š •‡Ž‡…–‹˜‹–› ˆ‘” –Š‡ †‡–‡…–‹‘ ‘ˆ „Ž‘‘† •—„Ǧ‰”‘—’•A1 and A2Ǥ Š‡ –™‘•—„Ǧ‰”‘—’•†‹ơ‡” ‹•—”ˆƒ…‡…‡ŽŽ •–”—…–—”‡•ƒ†Šƒ˜‡†‹ơ‡”‡– ƒ–‹‰‡†‡•‹–›‘‘—–‡”…‡ŽŽ‡„”ƒ‡Ǥ‘Ž›˜‹›Ž’›””‘Ž‹†‘‡Žƒ›‡” Šƒ•„‡‡—•‡†ˆ‘”•—”ˆƒ…‡‹’”‹–‹‰‘ˆA1 and A2 and then mass •‡•‹–‹˜‡‡ƒ•—”‡‡–•™‡”‡’‡”ˆ‘”‡†–‘‡šƒ‹‡–Š‡•‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ –Šƒ•„‡‡‘„•‡”˜‡†–Šƒ–A1 ‹’”‹–‡†‡”›–Š”‘…›–‡’‘Ž›‡”‰‹˜‡•

higher signals for A1 than A2ƒ†•ƒ‡‹•–”—‡™Š‡‹–‹•”‡˜‡”•‡†Ǥ Š‡Š‹‰Š•‡Ž‡…–‹˜‹–›ƒ••Š‘™‹ ‹‰Ǥͳ͸Ǥͺ™ƒ•ƒ…Š‹‡˜‡†‘Ž›†—‡–‘ –Š‡†‹ơ‡”‡…‡‹–Š‡•—”ˆƒ…‡ƒ–‹‰‡’ƒ––‡”•™Š‹…Š‹•˜‡”›’”‡…‹•‡Ž› …ƒ•–‡† „› •—”ˆƒ…‡ ‹’”‹–‹‰ –‡…Š‹“—‡Ǥ ‘”‡‘˜‡”ǡ “—ƒ–‹–ƒ–‹˜‡ ‹ˆ‘”ƒ–‹‘ƒ„‘—––Š‡•—”ˆƒ…‡…ƒƒŽ•‘„‡†‡†—…‡†ƒ•–Š‡‹’”‹–‡† •—”ˆƒ…‡ ‹–‡”ƒ…–• ™‹–Š ™Š‘Ž‡ …‡ŽŽ •–”—…–—”‡Ǥ Š‡ ŠƒŽŽƒ” ‘ˆ ‹’”‹–‹‰‡–Š‘†‹•–Šƒ–‹–’”‘˜‹†‡•Š‹‰ŠϐŽ‡š‹„‹Ž‹–›ƒ†‡…Šƒ‹…ƒŽ •–ƒ„‹Ž‹–›ˆ‘”•‘ˆ–ƒ–—”‡‘ˆ”‡†„Ž‘‘†…‡ŽŽ•™‹–Š‘—–ƒ›†‹•–‘”–‹‘ǤŠ‡ ƒŒ‘”ƒ…Š‹‡˜‡‡–‹•–Šƒ–ƒŽŽ–Š‡•‡‹–‡”ƒ…–‹‘•’”‘˜‹†‡†„›•—”ˆƒ…‡ ‹’”‹–‹‰ƒ”‡ˆ—ŽŽ›”‡˜‡”•‹„Ž‡ƒ†–Š—•ƒ”‡”‡ƒŽ…‘–‡†‡”•‘ˆƒ–—”ƒŽ ”‡…‡’–‘”•Ǥ‰‡‡”ƒŽ•—”ˆƒ…‡Ǧ‹’”‹–‡†•›–Š‡–‹…”‡…‡’–‘”•’”‘˜‹†‡ •‡•‹–‹˜‡ǡ •‡Ž‡…–‹˜‡ ƒ† ”‡Žƒ–‹˜‡Ž› Ž‘™ …‘•– †‡–‡…–‹‘ •…Š‡‡• ˆ‘” ƒ‹ƒ†‡˜‡•—„„Ž‘‘†‰”‘—’•Ǥ

Š‡ •—’’Ž› ‘ˆ ’—”‡ ƒ† …Ž‡ƒ ˆ‘‘† •–—ơ ˆ”‡‡ ˆ”‘ ’ƒ–Š‘‰‡‹… …‘–ƒ‹ƒ–‹‘ ‹•‘•– †‡ƒ†‹‰ –ƒ• ‹ –Š‡‘†‡”™‘”Ž† †—‡ –‘‰”‡ƒ–…‘…‡”‘˜‡”’—„Ž‹…Š‡ƒŽ–Šƒ†•ƒˆ‡–›ǤŽ”‡ƒ†›‡•–ƒ„Ž‹•Š‡† ‡–Š‘† ˆ‘” „ƒ…–‡”‹ƒŽ †‡–‡…–‹‘ ‹• „ƒ•‡† ‘ …‘Ž‘› …‘—–‹‰ –‡…Š‹“—‡™Š‹…Š ‹• ”‡Ž‹ƒ„Ž‡ –‡…Š‹“—‡Ǣ Š‘™‡˜‡”ǡ –Š‡ Ž‘‰ ƒƒŽ›•‹• –‹‡ ȏͷͳȐ ’”‘Š‹„‹–• ‹–• —•‡ ˆ‘” ƒ‹‰ “—‹… †‡…‹•‹‘Ǥ Š‡”‡ˆ‘”‡ǡ ƒ …‘’”‡Š‡•‹˜‡ †‡–‡…–‹‘ ’Žƒ •Š‘—Ž† „‡ †‡•‹‰‡† ˆ‘” –Š‡•‡ ’ƒ–Š‘‰‡•Ǥ – –Š‡‘‡– –Š‡”‡ ƒ”‡ •‡˜‡”ƒŽ ‡•–ƒ„Ž‹•Š‡†‡–Š‘†•

ˆ‘”’”‡…‹•‡ƒ†”ƒ’‹††‡–‡…–‹‘™‹–ŠŠ‹‰Š•‡•‹–‹˜‹–›‹…Ž—†‹‰•‘‡ ‘†‡” –‡…Š‹“—‡• •—…Š ƒ• …Š‹’•ǡ ǡ ƒ† ƒ• ‡ƒ”Ž‹‡” ‡–‹‘‡†Ǥ Š‡•‡ ‡–Š‘†• ƒ”‡ Š‹‰ŠŽ› •—‹–ƒ„Ž‡ ˆ‘” ˆƒ•–‡” ƒƒŽ›•‹• ™‹–Š•‹‰‹ϐ‹…ƒ–Ž› Ž‘™Ǧ†‡–‡…–‹‘ Ž‹‹–•ƒ†˜‡”›†‡•‹”ƒ„Ž‡ ˆ‘”‡ƒ”Ž› †‹ƒ‰‘•‹•Ǥ‘”‡‘˜‡”ǡ–Š‡†‡–‡…–‹‘‘ˆ–Š‘•‡’ƒ–Š‘‰‡‹…„ƒ…–‡”‹ƒ…ƒ ƒŽ•‘„‡ƒ†‡™Š‹…Šƒ”‡†‹ˆϐ‹…—Ž– –‘ …—Ž–‹˜ƒ–ƒ„Ž‡‘”Šƒ˜‡‡š–”‡‡Ž› •Ž‘™ ‰”‘™–Š ”ƒ–‡Ǥ ’ƒ”– ˆ”‘ –Š‡‹” …Ž‹‹…ƒŽ •‹‰‹ϐ‹…ƒ…‡ǡ –Š‡ Š‹‰Š ƒƒŽ›•‹•…‘•–ƒ†‡‡†‘ˆ™‡ŽŽǦ–”ƒ‹‡†’‡”•‘‡Ž–‘Šƒ†Ž‡–Šƒ–†‘‡• ‘–•‡”˜‡–Š‡’—”’‘•‡‘ˆŽ‘™Ǧ…‘•–•‹’Ž‡†‡–‡…–‹‘•›•–‡•Ǥ Š‡”‡ˆ‘”‡ǡƒ—„‡”‘ˆƒ––‡’–•Šƒ˜‡„‡‡ƒ†‡‹†‡˜‡Ž‘’‹‰ ”ƒ’‹†„ƒ…–‡”‹ƒŽ•‡•‘”•›•–‡•‘ˆŠ‹‰Š’”‡…‹•‹‘ƒ†Ž‘™…‘•–‹…Ž—†‹‰ ‡Ž‡…–”‘…Š‡‹…ƒŽ‹’‡†ƒ…‡ȏͷʹǡͷ͵ȐǡȏͷͶǡͷͷȐǡ…Š‡‹Ž—‹‡•…‡…‡ ȏͷ͸Ȑƒ†•‘‡‘–Š‡”‘’–‹…ƒŽ‡–Š‘†•Ǥƒ•••‡•‹–‹˜‡†‡˜‹…‡•Šƒ˜‡ƒŽ•‘ ƒŒ‘”…‘–”‹„—–‹‘‹†‡˜‡Ž‘’‹‰„ƒ…–‡”‹ƒŽ•‡•‘”•ȏͷ͹ǡͷͺȐǤ‹ơ‡”‡– ”‡…‘‰‹–‹‘ƒ–‡”‹ƒŽ•Šƒ˜‡„‡‡—•‡†‹…Ž—†‹‰ƒ–—”ƒŽƒ†ƒ”–‹ϐ‹…‹ƒŽ ƒ–‹„‘†› ȏͷͻȐ Žƒ›‡”•ǡ ȏ͸ͲȐ ƒ† •‘‡ ƒ‘ƒ–‡”‹ƒŽ• ȏ͸ͳȐ ˆ‘” •‡•‹‰‘ˆ†‹ơ‡”‡–„ƒ…–‡”‹ƒŽ•’‡…‹‡•ǡ‡Ǥ‰ǤE. coliƒ†‘–Š‡”•ǤE. coli is ƒ‰”ƒ‡‰ƒ–‹˜‡„ƒ…–‡”‹—Šƒ˜‹‰•‘‡•–”ƒ‹•‡š–”‡‡Ž›‹ˆ‡…–‹‘—• ˆ‘” Š—ƒ• ƒ† –Šƒ– ‹•™Š› „‡‹‰ …‡–”‡ ‘ˆ ˆ‘…—• ‘ˆ •…‹‡–‹•–• ‹ †‡˜‡Ž‘’‹‰•—‹–ƒ„Ž‡†‡–‡…–‹‘•…Š‡‡•ǤŠ‡ƒ––ƒ…Š‡–‘ˆ†‹ơ‡”‡– „ƒ…–‡”‹ƒŽ •–”ƒ‹• –‘ •›–Š‡–‹… •—”ˆƒ…‡• Šƒ• „‡‡ …‘’”‡Š‡•‹˜‡Ž› †‹•…—••‡†„›—Ž‹ơ‡et al.ȏ͸ʹȐǤ—–Š‘”•Šƒ†‡š’Žƒ‹‡†–Šƒ–•—„•–”ƒ–‡ ’”‘’‡”–‹‡••—…Šƒ•Š›†”‘’Š‘„‹…‹–›ǡŠ›†”‘’Š‹Ž‹…‹–›ǡ•—”ˆƒ…‡”‘—‰Š‡••ǡ ƒ†•–‡”‹…Š‹†”ƒ…‡ƒ†•—”ˆƒ…‡ˆ—…–‹‘ƒŽ‹–›Šƒ˜‡‹’‘”–ƒ–‡ơ‡…–• ‘ƒ†Š‡•‹‘‘ˆ„ƒ…–‡”‹ƒǤŠ‡•–—†›‹•˜ƒŽ—ƒ„Ž‡‹–‡”•‘ˆ‡˜ƒŽ—ƒ–‹‰ –Š‡ ‘’–‹ƒŽ •—”ˆƒ…‡ •–”—…–—”‡• ˆ‘” †‡–‡…–‹‘ ‘ˆ „‹‘Ž‘‰‹…ƒŽ •’‡…‹‡• •—…Šƒ•„ƒ…–‡”‹ƒƒ†–Š—•…‘—’Ž‹‰–Š‡™‹–Šƒ•—‹–ƒ„Ž‡–”ƒ•†—…‡” –Šƒ–…ƒ‘‹–‘”–Š‡•‡‡˜‡–•Ǥ ’ƒ”– ˆ”‘ ƒ–—”ƒŽ ƒ† •‘‡ •›–Š‡–‹… ƒ–‹„‘†‹‡•ǡ …‘ƒ–‡† ™‹–Š ‰‘Ž† ƒ‘’ƒ”–‹…Ž‡• ȏ͸͵ǡ͸ͶȐ Šƒ• ƒŽ•‘ „‡‡ —•‡† ˆ‘” E. coli ‘‹–‘”‹‰Ǥ Š‹• …‘—Ž† „‡ —•‡ˆ—Ž ˆ‘” ‰‡––‹‰ ‰‘‘† „ƒ…–‡”‹ƒŽ ƒ––ƒ…Š‡–„—–‘„˜‹‘—•Ž›–Š‡•‡Ž‡…–‹˜‹–›‹•‘–‡ƒ•‹Ž›ƒ…Š‹‡˜ƒ„Ž‡Ǥ —…–‹‘ƒŽ‹œ‡†…ƒ”„‘Š›†”ƒ–‡’‘Ž›‡”•ȏ͸ͷȐŠƒ˜‡„‡‡”‡’‘”–‡† ˆ‘” „ƒ…–‡”‹ƒŽ †‡–‡…–‹‘ǡ ‹Ǥ‡Ǥ E. coli „› ϐŽ—‘”‡•…‡…‡ –‡…Š‹“—‡Ǥ ƒ”„‘Š›†”ƒ–‡ •—”ˆƒ…‡ –”‡ƒ–‡†™‹–Š’Ǧ’Š‡›Ž‡‡‡–Š›Ž›Ž‡‡ –ƒ‡•ƒ ͳͲȂͳͷ‹ –‹‡ –‘„‹†E. coli ƒ†’”‘†—…‹‰ ϐŽ—‘”‡•…‡…‡•‹‰ƒŽǤ ”‡Žƒ–‹˜‡Ž›‡™•‡•‹‰ƒ–‡”‹ƒŽŠƒ•„‡‡†‡•‹‰‡†„›‡š’Ž‘‹–‹‰ –Š‡…ƒ”„‘Š›†”ƒ–‡Ž‡…–‹‹–‡”ƒ…–‹‘•ȏ͸͸Ȑˆ‘”„ƒ…–‡”‹ƒŽ•‡•‹‰–ƒ‹‰ ƒ• –”ƒ•†—…‡”Ǥ Š‡ ‘—–‡” …‡ŽŽ™ƒŽŽ ‘ˆ „ƒ…–‡”‹ƒ ‹• ”‹‰‹† Šƒ˜‹‰ …‘’Ž‡š•–”—…–—”‡ƒ†‡‘ˆ’”‘–‡‹•ǡ…ƒ”„‘Š›†”ƒ–‡•ƒ† Ž‹’‹†•ƒ†

Ž‹’‘’‘Ž›•ƒ……Šƒ”‹†‡• ȋȌ ™Š‹…Š …‘˜‡” ‡ƒ”Ž› ͹ͷΨ ‘ˆ –Š‡ ‘—–‡” …‡ŽŽ •—”ˆƒ…‡Ǥ Šƒ˜‡ Ǧƒ–‹‰‡ •–”—…–—”‡ ™Š‹…Š ‹• ”‡ƒŽ …”‘••‹‰ ’‘‹–„‡–™‡‡…‡ŽŽ‡„”ƒ‡‘ˆ‰”ƒ‡‰ƒ–‹˜‡„ƒ…–‡”‹ƒƒ†‘—–‡” ‡˜‹”‘‡–Ǥ Š‡ •’‡…‹ϐ‹… „‹†‹‰ …Šƒ”ƒ…–‡” ‘ˆ Ǧƒ–‹‰‡• …ƒ „‡ —•‡† ˆ‘”†‡•‹‰‹‰Š‹‰ŠŽ› •‡Ž‡…–‹˜‡ ”‡…‘‰‹–‹‘ƒ–‡”‹ƒŽ• ˆ‘” ‰”ƒ ‡‰ƒ–‹˜‡ „ƒ…–‡”‹ƒŽ †‡–‡…–‹‘Ǥ ƒ‘•‡ ™ƒ• —•‡† ƒ• •‡•‹–‹˜‡ …‘ƒ–‹‰ ƒ–‡”‹ƒŽ ˆ‘” •‡Ž‡…–‹˜‡Ž› „‹†‹‰ Ž‡…–‹Ǧ‡†‹ƒ–‡† E. coli ͳͶͺͷǤŠ‹•‹•–Š‡ˆƒ…––Šƒ–…ƒ”„‘Š›†”ƒ–‡Ȃ…ƒ”„‘Š›†”ƒ–‡‹–‡”ƒ…–‹‘• ƒ”‡™‡ƒ‡”‹…‘’ƒ”‹•‘–‘…ƒ”„‘Š›†”ƒ–‡Ȃ’”‘–‡‹‹–‡”ƒ…–‹‘•Ǥ‘ Ž‡…–‹Ǧ–”‡ƒ–‡†E. coli •—”ˆƒ…‡ ‹• Šƒ†› –‘ „‹†™‹–Šƒ‘•‡ Žƒ›‡” ‘”‡”‹‰‹†Ž›”ƒ–Š‡”–ŠƒϐŽ‡š‹„Ž‡‹–‡”ƒ…–‹‘ǤŠ‹•‹•˜‡”›—•‡ˆ—Ž™Š‡ —•‹‰ ƒ…‘—•–‹… †‡˜‹…‡• ƒ• –”ƒ•†—…‡”• „‡…ƒ—•‡ –Š‡ ”‹‰‹† „‘—†‡† ƒ••‰‹˜‡•†‹”‡…–ˆ”‡“—‡…›•Š‹ˆ–•‹‰ƒŽ•™‹–Š…‘•‹†‡”ƒ„Ž‡Ž‘™‘‹•‡ ƒ††”‹ˆ–Ǥ–Š‡ƒ„•‡…‡‘ˆŽ‡…–‹–Š‡„‹†‹‰‹•‘–•–”‘‰ƒ†™ƒ–‡” Žƒ›‡”•–”ƒ’•‹„‡–™‡‡–Š‡…‡ŽŽƒ†–Š‡•—”ˆƒ…‡Ž‡ƒ†–‘‹…”‡ƒ•‡–Š‡ †ƒ’‹‰ Ž‘••Ǥ ‡•—Ž–• ˆ”‘ ‡ƒ•—”‡‡–• ‹†‹…ƒ–‡ ƒ Ž‹‡ƒ” ”‡Žƒ–‹‘•Š‹’„‡–™‡‡ˆ”‡“—‡…›•Š‹ˆ–ƒ†–Š‡Ž‘‰ƒ”‹–Š‹…„ƒ…–‡”‹ƒŽ …‡ŽŽ…‘…‡–”ƒ–‹‘‘˜‡”ƒ™‹†‡…‘…‡–”ƒ–‹‘”ƒ‰‡ǡ ‹Ǥ‡Ǥ ˆ”‘͹Ǥͷέ ͳͲʹ –‘ ͹Ǥͷ έ ͳͲ7 …‡ŽŽ•ȀǤ ‘•‹†‡”ƒ„Ž‡ Ž‘™‡” †‡–‡…–‹‘ Ž‹‹–ǡ ‹Ǥ‡Ǥ ͹ǤͷέͳͲʹ …‡ŽŽ•Ȁ™ƒ•ƒ…Š‹‡˜‡† ‹ …‘’ƒ”‹•‘ –‘‘–Š‡”‡–Š‘†• ”‡’‘”–‡†‹Ž‹–‡”ƒ–—”‡ǤŠ‡•‡•‘”•’‡…‹ϐ‹…‹–›™ƒ•ƒŽ•‘…Šƒ”ƒ…–‡”‹œ‡† „› …‘–”‘Ž ‡š’‡”‹‡–• ƒ† ‡š’‘•‹‰ –Š‡ Žƒ›‡” –‘ ‰”ƒ ’‘•‹–‹˜‡ „ƒ…–‡”‹ƒǡ ‹Ǥ‡ǤStaphylococcus aureus. Š‡‘„•‡”˜‡† ˆ”‡“—‡…› •Š‹ˆ–• ™‡”‡ ‡‰Ž‹‰‹„Ž‡ ƒ• …‘’ƒ”‡ –‘ E. coli ͳͶͺͷ ‡šŠ‹„‹–‹‰ ƒ Š‹‰ŠŽ› •‡Ž‡…–‹˜‡ƒ–—”‡‘ˆ–Š‡Žƒ›‡”ǤŠ‡•–”ƒ–‡‰›‹•“—‹–‡‹–‡”‡•–‹‰ƒ†…ƒ „‡‰‡‡”ƒŽ‹œ‡† ˆ‘” –Š‡†‡–‡…–‹‘‘ˆ˜ƒ”‹‘—•‘–Š‡”„ƒ…–‡”‹ƒŽ •’‡…‹‡• ™‹–Š‡Šƒ…‡†•‡•‹–‹˜‹–›ƒ†•‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ ‘Ž‡…—Žƒ” ‹’”‹–‹‰ Šƒ• ƒŽ•‘ ‹’‘”–ƒ– ”‘Ž‡ ‹ †‡•‹‰‹‰ •‡•‹–‹˜‡’‘Ž›‡”Žƒ›‡”•ˆ‘”„ƒ…–‡”‹ƒŽ†‡–‡…–‹‘ǤŠ‡—•‡‘ˆƒ…‘—•–‹… †‡˜‹…‡•‹…‘„‹ƒ–‹‘™‹–Š‹’”‹–‡†’‘Ž›‡”•Šƒ•„‡…‘‡˜‡”› ’‘’—Žƒ”•–›Ž‡‘ˆ‘†‡”„‹‘•‡•‘”•Ǥ—”ˆƒ…‡Ǧ‹’”‹–‡†’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ Žƒ›‡”Šƒ•„‡‡—•‡†ˆ‘”E. coli†‡–‡…–‹‘–ƒ‹‰ƒ•–”ƒ•†—…‡” †‡˜‹…‡Ǥ•‡ƒ”Ž‹‡”†‡•…”‹„‡†•—”ˆƒ…‡‹’”‹–‹‰’”‘†—…‡•‹œ‡•’‡…‹ϐ‹… ’‹–•ˆ‘”ƒƒŽ›–‡–‘„‡†‡–‡…–‡†ƒ†„›…‘–”‘ŽŽ‹‰–Š‡’‘Ž›‡”‹œƒ–‹‘ ’”‘…‡†—”‡”‡˜‡”•‹„Ž‡‹–‡”ƒ…–‹‘•…ƒ„‡†‡˜‡Ž‘’‡†Ǥ…‘’ƒ”‹•‘ to the imprinting of yeast cells the E. coli Šƒ˜‡—…Š •ƒŽŽ‡” •‹œ‡ ƒ††‹‡•‹‘••‘–Š‡ ‹’”‹–‡†…ƒ˜‹–‹‡•ƒ”‡‘–™‡ŽŽ†‡ϐ‹‡†„—– •–‹ŽŽ ‰‘‘† ‡‘—‰Š ˆ‘” •‡Ž‡…–‹˜‡Ž› ”‡…‘‰‹œ‹‰ ƒƒŽ›–‡•Ǥ Š‹• …ƒ„‡ ‡š’Žƒ‹‡†„› –Š‡ ˆ”‡“—‡…›•Š‹ˆ–•‘ˆ ‹’”‹–‡†ƒ†‘Ǧ‹’”‹–‡† ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡Žƒ›‡”•ǤŠ‡ ‹ƒ‰‡‘ˆE. coli imprinted polyurethane

Žƒ›‡”ƒ†–Š‡•‡•‘”‡ơ‡…–‘ˆ‹’”‹–‡†ƒ†”‡ˆ‡”‡…‡…Šƒ‡ŽŠƒ• „‡‡ •—ƒ”‹œ‡† ‹ ‹‰Ǥ ͳ͸ǤͻǤ – ‹• ‘„˜‹‘—• ˆ”‘ –Š‡ ϐ‹‰—”‡ –Šƒ– imprinted surface demonstrates much higher sensor signal although

–Š‡…‘’‘•‹–‹‘ƒ†’”‡’ƒ”ƒ–‹‘‘ˆ„‘–Š’‘Ž›‡”Žƒ›‡”•‹••ƒ‡Ǥ

•‡”‹‡•‘ˆ”‡•‡ƒ”…Š’ƒ’‡”•Šƒ˜‡„‡‡’—„Ž‹•Š‡†ˆ‘”•›–Š‡•‹œ‹‰ ƒ”–‹ϐ‹…‹ƒŽ ‰‡Ž ƒ–‹„‘†‹‡• –Š”‘—‰Š ‹’”‹–‹‰ ’”‘…‡†—”‡ ˆ‘” –Š‡ †‡–‡…–‹‘ ‘ˆ ’”‘–‡‹•ǡ ˜‹”—•‡• ƒ† „ƒ…–‡”‹ƒ —•‹‰ ‡Ž‡…–”‘’Š‘”‡•‹• ‡–Š‘†ǤƒŽŽ–Š‡•‡’ƒ’‡”•ƒ‰‡‡”ƒŽ•›–Š‡–‹…•–”ƒ–‡‰›™ƒ•ƒ’’Ž‹‡† ˆ‘”’”‡’ƒ”‹‰ƒ”–‹ϐ‹…‹ƒŽ‰‡Ž”‡…‡’–‘”•ȏͷͻȐǤ…”›Žƒ‹†‡ƒ•‘‘‡” ƒ†ǡǦ‡–Š›Ž‡‡„‹•ƒ…”›Žƒ‹†‡ ƒ• …”‘••ǦŽ‹‡”™‡”‡‹š‡†™‹–Š „ƒ…–‡”‹ƒŽ•—•’‡•‹‘ ‹ –Š‡’”‡•‡…‡‘ˆ’Š‘•’Šƒ–‡„—ơ‡”•‘Ž—–‹‘Ǥ Š‡ ”‡ƒ…–‹‘ ™ƒ• ‹‹–‹ƒŽ‹œ‡† „› ƒ††‹‰ ƒ‘‹— ’‡”•—Žˆƒ–‡ •‘Ž—–‹‘ƒ†ƒŽŽ‘™‡†–‘’‘Ž›‡”‹œ‡‘˜‡”‹‰Š–ǤŠ‡’‘Ž›‡”‹œ‡†‰‡Ž ™ƒ•‰”ƒ—Žƒ–‡†„›͸Ͳƒ†ͳͲͲ‡•Š•‹œ‡‡–•”‡•’‡…–‹˜‡Ž›ǡ™Š‹Ž‡–Š‡ –‡’Žƒ–‡…ƒ„‡”‡‘˜‡†„›—•‹‰ Ž›•‘œ›‡ƒ†–Š‡•—„•‡“—‡– ™ƒ•Š‹‰ ‡–Š‘†Ǥ •‹‹Žƒ” ’”‘–‘…‘Ž ™ƒ• ˆ‘ŽŽ‘™‡† ˆ‘” ’”‡’ƒ”‹‰ „Žƒ‰‡Ž™‹–Š‘—––Š‡ƒ††‹–‹‘‘ˆ„ƒ…–‡”‹ƒǤ

The result of electrophoretic migration of imprinted particles

•Š‘™• –Šƒ– „ƒ…–‡”‹ƒ …‘–ƒ‹‹‰ ‰”ƒ‹• ˆ‘ŽŽ‘™ ƒ …‡”–ƒ‹ ‹‰”ƒ–‹‘

’ƒ–Š—†‡”ƒ’’Ž‹‡†‡Ž‡…–”‹…ϐ‹‡Ž†™Š‡”‡ƒ•‘Ǧ‹’”‹–‡†ǡ‹Ǥ‡Ǥ„Žƒ ’ƒ”–‹…Ž‡•Žƒ…–Š‹•ƒ„‹Ž‹–›ǤŠ‡™ƒ•Š‹‰‘ˆ–Š‡‹’”‹–‡†‰”ƒ‹•ƒ‡• –Š‡ –‘ „‡Šƒ˜‡ ‡šƒ…–Ž› •ƒ‡ ƒ• ‘Ǧ‹’”‹–‡† ”‡˜‡ƒŽ‹‰ –Šƒ– –Š‡ ™ƒ•Š‹‰ ’”‘…‡••™ƒ• •—……‡••ˆ—ŽǤ Š‡ •‡Ž‡…–‹˜‹–› ‘ˆ –Š‡ ‰”ƒ‹•™ƒ• ƒŽ•‘ ‡šƒ‹‡† „› ‹…—„ƒ–‹‰ ™‹–Š ‹’”‹–‡† „ƒ…–‡”‹ƒŽ •–”ƒ‹ǡ ‹Ǥ‡Ǥ E. coli Ǧ͸ͲͲ ƒ† ‘–Š‡” …‘’‡–‹‰ „ƒ…–‡”‹ƒ E. coli ǦʹͳǤ Š‡ ”‡•—Ž–•’”‡•‡–‡†‹ ‹‰Ǥͳ͸ǤͳͲ‹†‹…ƒ–‡ƒ•–”‘‰‹–‡”ƒ…–‹‘‘ˆ‰”ƒ‹• ™‹–Š ‹’”‹–‡†E. coli Ǧ͸ͲͲ –Š—• Š‹‰Š‹‰”ƒ–‹‘ ˜‡Ž‘…‹–›™ƒ• ‘„•‡”˜‡†ˆ‘”Ǧ͸ͲͲ„ƒ…–‡”‹ƒƒ•…‘’ƒ”‡–‘ǦʹͳǤ…‘–”ƒ•––‘ …Š”‘ƒ–‘‰”ƒ’Š‹… ƒƒŽ›•‹•ǡ ‡Ž‡…–”‘’Š‘”‡•‹• †‘‡• ‘– ”‡“—‹”‡ Žƒ”‰‡ ƒ‘—– ‘ˆ ƒƒŽ›–‡ •ƒ’Ž‡•Ǥ Š‡”‡ˆ‘”‡ǡ –Š‡ †‡–‡…–‹‘ ‘ˆ ˜‹”—•‡• ƒ† „ƒ…–‡”‹ƒ •ƒ’Ž‡• „‡…‘‡• ‡ƒ•‹‡” ™Š‹…Š ™ƒ• ’”‡˜‹‘—•Ž› ‘– ’‘••‹„Ž‡Ǥ

ǤŠƒ‰et al.ȏ͸͹ȐŠƒ˜‡ƒ†‘’–‡†Š‹‡”ƒ”…Š‹…ƒŽ‹’”‹–‡†’‘Ž›‡” surfaces for E. coliƒ†Š‡•‹‘—•‹‰“—ƒ”–œ‹…”‘„ƒŽƒ…‡ƒ•–”ƒ•†—…‡”Ǥ Š‡•–”ƒ–‡‰›‹•†‹ơ‡”‡–‹”‡‰ƒ”†–‘’”‡˜‹‘—•Ž›‡š’Žƒ‹‡†‡šƒ’Ž‡• for E. coli ƒ†Š‡•‹‘Ǥ ‹”•– –Š‡› Šƒ† †‡’‘•‹–‡† ’‘Ž›•–›”‡‡ ϐ‹Ž• ‘ˆ •—‹–ƒ„Ž‡–Š‹…‡••‘–Š‡ƒˆ–‡”–Š‡Žƒ›‡”™ƒ•‹’”‹–‡†„›–™‘

–›’‡•‘ˆ•‹Ž‹…‘‘Ž†ǡ‹Ǥ‡Ǥʹρƒ†ʹͷͲ‰”ƒ–‹‰•™‹–Š†‹ơ‡”‡– ƒŽ‹‰‡–•Ǥ Š‡•‡ †‹ơ‡”‡– •—”ˆƒ…‡• ™‡”‡ ‹’”‹–‡† ƒ– †‹ơ‡”‡– …‘†‹–‹‘• ‘ˆ –‡’‡”ƒ–—”‡ ƒ† ’”‡••—”‡Ǥ Š‡•‡ •–”—…–—”‡• ™‡”‡ •–‡”‹Ž‹œ‡†’”‹‘”–‘„ƒ…–‡”‹ƒŽƒ†Š‡•‹‘Ǥ‘Ž›•–›”‡‡ϐ‹Ž™ƒ•ˆƒ„”‹…ƒ–‡† „›E. coli …—Ž–—”‡ƒ†’Žƒ…‡† –Š‡ ‹ ‹…—„ƒ–‘” ˆ‘” •‘‡Š‘—”• –‘ ƒ˜‘‹†•‡†‹‡–ƒ–‹‘Ǥ‡•‹†‡–™‘ƒ‹•–”—…–—”‡•‘ˆʹρƒ†ʹͷͲ ǡ–™‘ƒ††‹–‹‘ƒŽ•—”ˆƒ…‡•™‡”‡‰‡‡”ƒ–‡†„›–ƒ‹‰ʹͷͲ‘ʹ ρ‰”ƒ–‹‰™‹–Š’‡”’‡†‹…—Žƒ”ƒ†’ƒ”ƒŽŽ‡Ž†‹‡•‹‘•ǤƒŽŽˆ‘—” †‹ơ‡”‡– •—”ˆƒ…‡• ™‡”‡ †‡•‹‰‡† ‘ ™Š‹…Š „ƒ…–‡”‹ƒŽ ƒ––ƒ…Š‡– ™ƒ•…Šƒ”ƒ…–‡”‹œ‡†„›ϐŽ—‘”‡•…‡…‡‹…”‘•…‘’›Ǥ Ž—‘”‡•…‡…‡‹ƒ‰‡• ”‡˜‡ƒŽ†‹ơ‡”‡–ƒˆϐ‹Ž‹ƒ–‹‘•‘ˆE. coli™‹–Šˆ‘—”†‹ơ‡”‡–•—”ˆƒ…‡•Ǥƒ•• •‡•‹–‹˜‡‡ƒ•—”‡‡–•†‡‘•–”ƒ–‡–Šƒ–E. coli mass deposition on Š›„”‹†•–”—…–—”‡ǡ‹Ǥ‡ǤʹͷͲ’‡”’‡†‹…—Žƒ”–‘ʹρ•—”ˆƒ…‡‹•Š‹‰Š „›ƒˆƒ…–‘”‘ˆʹƒ†Ͷ–Šƒʹρƒ†ʹͷͲ•–”—…–—”‡•ǡ”‡•’‡…–‹˜‡Ž›Ǥ This enhanced attachment of E. coli–‘Š›„”‹†•–”—…–—”‡™ƒ•ˆ—”–Š‡” ‹˜‡•–‹‰ƒ–‡† „› •…ƒ‹‰ ‡Ž‡…–”‘‹…”‘•…‘’› ȋȌ •–—†‹‡•Ǥ Š‡ ‹ƒ‰‡••Š‘™•–Šƒ–Žƒ–‡”ƒŽE. coli †‹‡•‹‘•’”‡ˆ‡”•–‘„‹†‘ʹρ •–”—…–—”‡„›–”ƒ’’‹‰‹–”‡…Š‡”•ƒ†Ž›‹‰ƒ…”‘••–Š‡•—”ˆƒ…‡‹…ƒ•‡ ‘ˆʹͷͲ‰”ƒ–‹‰Ǥ—”’”‹•‹‰Ž›ǡ‹Š›„”‹†•–”—…–—”‡–Š‡–”ƒ’’‹‰ƒ† ƒ†Š‡”‡…‡‡ơ‡…–•ƒ”‡•›‡”‰‹œ‡†ƒ†ƒ—…Š‹’”‘˜‡†E. coli„‹†‹‰ –ƒ‡•’Žƒ…‡ǤŠ‡Š‹‡”ƒ”…Š‹…ƒŽ‹’”‹–‹‰ƒ’’”‘ƒ…Š‹•‹–‡”‡•–‹‰ˆ‘” ‡Šƒ…‹‰ –Š‡ „ƒ…–‡”‹ƒŽ ƒ†Š‡•‹‘ „› •‡Ž‡…–‹‰ ƒ’’”‘’”‹ƒ–‡ Š›„”‹† •–”—…–—”‡•ǢŠ‘™‡˜‡”ǡ –Š‡•‡Ž‡…–‹˜‹–›‘ˆ –Š‡•‡•—”ˆƒ…‡•Šƒ†‘–„‡‡ †‡•…”‹„‡†Ǥ ”‰ƒ‹…ƒŽŽ› ‘†‹ϐ‹‡† •‘ŽǦ‰‡Ž ƒ–‡”‹ƒŽ• ȋȌ Šƒ˜‡ ƒŽ•‘ „‡‡—•‡†ˆ‘”„ƒ…–‡”‹ƒŽ‹’”‹–‹‰ȏ͸ͺȐǤŠ‡‹’”‹–‹‰’”‘…‡••™ƒ• …ƒ””‹‡†‘—–„›‹š‹‰–Š‡•‘ŽǦ‰‡Ž•‘Ž—–‹‘™‹–Š„ƒ…–‡”‹ƒŽ•—•’‡•‹‘ ƒ†–Š‡…‘ƒ–‡†‘‰Žƒ•••—„•–”ƒ–‡–‘Šƒ˜‡ƒϐ‹‡•‘‘–Š‹’”‹–‡† Žƒ›‡”ǤŠ‡‹’”‹–‡†•—”ˆƒ…‡™ƒ•…Šƒ”ƒ…–‡”‹œ‡†„›˜ƒ”‹‘—•‹–‡”ˆƒ…‹ƒŽ ‹ƒ‰‹‰ –‡…Š‹“—‡• •—…Š ƒ• ǡ ƒ† ‘–Š‡”•Ǥ Š‡•‡ •–—†‹‡• •—‰‰‡•––Šƒ––Š‡‹’”‹–‡†•‘ŽǦ‰‡Žϐ‹Ž•Šƒ˜‡ƒˆϐ‹‹–›…ƒ˜‹–‹‡•‘™Š‹…Š ‘—–‡”„ƒ…–‡”‹ƒŽ•—”ˆƒ…‡‹•”‡…‘‰‹œ‡†ƒ†–Š—••‡Ž‡…–‹˜‹–›‹•ƒ…Š‹‡˜‡†Ǥ Ž–Š‘—‰Š –Š‡ •‘ŽǦ‰‡Ž ƒ–‡”‹ƒŽ •Š‘™• ‰‘‘† •‡Ž‡…–‹˜‹–› „—– ƒ—–Š‘”• does not design a concrete sensor setup coupling the imprinted

•‡•‘” Žƒ›‡”• ™‹–Š ƒ •—‹–ƒ„Ž‡ –”ƒ•†—…‡”Ǥ ’”‹–‡† ƒ–‡”‹ƒŽ• ‹ …‘„‹ƒ–‹‘™‹–Š•‡˜‡”ƒŽ–”ƒ•†—…‡”†‡˜‹…‡•Šƒ˜‡•Š‘™•—„•–ƒ–‹ƒŽ ’‘–‡–‹ƒŽ ˆ‘” „ƒ…–‡”‹ƒŽ †‡–‡…–‹‘ ™‹–Š ‡Šƒ…‡† •‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ Š‡ †‡•‹‰ ƒ† ™‘”‹‰ ’”‹…‹’Ž‡ ‘ˆ –”ƒ•†—…‡” ‹• ˜‡”› ‹’‘”–ƒ– ‹ ‘”†‡”–‘…‘•–”—…–ƒŽ‘™Ǧ…‘•–„‹‘•‡•‘”…ƒ’ƒ„Ž‡‘ˆ‰‡‡”ƒ–‹‰”ƒ’‹† •‹‰ƒŽ•™‹–ŠŠ‹‰Š’”‡…‹•‹‘ƒ†›‹‡Ž†•Ž‘™Ǧ†‡–‡…–‹‘Ž‹‹–•Ǥ–™‘—Ž†

„‡˜‡”›ƒ†˜ƒ–ƒ‰‡‘—•ˆ‘”‘‹–‘”‹‰’ƒ–Š‘‰‡‹…„ƒ…–‡”‹ƒ‘–‘Ž› ˆ‘”…Ž‹‹…ƒŽƒ’’Ž‹…ƒ–‹‘•„—–ƒŽ•‘ˆ‘”ˆ‘‘†‹†—•–”›Ǥ

ƒ–‡”‹ƒŽ •–”—…–—”‹‰‘ˆƒ –›’‹…ƒŽ„‹‘•‡•‘” ‹•ƒ†‹ˆϐ‹…—Ž– –ƒ•™Š‡ ‰‘‹‰ ˆ”‘‹…”‘‡–‡” –‘ƒ‘‡–‡”•…ƒŽ‡ƒ†„‡…‘‡•‡“—ƒŽŽ› ‹’‘”–ƒ–‹ˆƒƒŽ›–‡‹•˜‹”ƒŽ•’‡…‹‡•Ǥ‹”—•‡•ƒ”‡‡š…‡’–‹‘ƒŽŽ›•ƒŽŽ ‡–‹–‹‡•Šƒ˜‹‰•‹œ‡ˆ”‘ˆ‡™ƒ‘‡–‡”•—’–‘•‘‡Š—†”‡†•ƒ† ƒ”‡•‘—”…‡‘ˆ˜ƒ”‹‘—•‹ˆ‡…–‹‘—•†‹•‡ƒ•‡•Ǥ‘‡˜‹”—•‡•ƒ”‡‡š–”‡‡Ž› †ƒ‰‡”‘—•–‘Š—ƒŠ‡ƒŽ–Šƒ†Ž‹ˆ‡‡Ǥ‰Ǥǡ‡’ƒ–‹–‹•ƒ†˜‹”—•ǡ ƒ††‡‰—‡˜‹”—•ǤŠ‡•‡’ƒ”–‹…—Žƒ”˜‹”—•‡•Šƒ˜‡„‡…‘‡”‡ƒŽ potential threat as they had caused thousands of infections and

…ƒ•—ƒŽ–‹‡•Ǥ ‡…‡–Ž›ǡ •™‹‡ ϐŽ—ǡ ‹Ǥ‡Ǥ ƒ ˜‹”ƒŽ †‹•‡ƒ•‡ǡ Šƒ† ‹ˆ‡…–‡† ƒ —„‡” ‘ˆ ’‡‘’Ž‡ ƒŽŽ ƒ”‘—† –Š‡™‘”Ž† ƒ†ƒ› …‘—–”‹‡• Šƒ˜‡ –‘ƒ‡ •’‡…‹ƒŽ •…”‡‡‹‰‘ˆ’ƒ••‡‰‡”• ƒ– ƒ‹”’‘”–ǤŠ—•ǡ ”‡Ž‹ƒ„Ž‡ǡ ”ƒ’‹†ǡƒ†…‘’”‡Š‡•‹˜‡†‡–‡…–‹‘•›•–‡•Š‘—Ž†„‡†‡•‹‰‡†ˆ‘” ˜‹”—••‡•‹‰Ǥ Š‡”‘—–‹‡…‡ŽŽ…—Ž–—”‡ –‡…Š‹“—‡•ƒ”‡‘–•—‹–ƒ„Ž‡ ˆ‘”‰‡––‹‰ ”ƒ’‹†ƒ†ƒ……—”ƒ–‡”‡•—Ž–•ƒ•–Š‡ƒƒŽ›•‹•–‹‡‹•“—‹–‡Ž‘‰ǡ‹Ǥ‡ǤʹȂͶ †ƒ›• ‘” ‡˜‡ Ž‘‰‡”Ǥ ††‹–‹‘ƒŽŽ›ǡ •‘‡–‹‡• „ƒ…–‡”‹ƒŽ ‘” –‘š‹• …‘–ƒ‹ƒ–‹‘•–”‘‰Ž›ƒơ‡…––Š‡”‡•—Ž–•Ǥ‘”‡‘˜‡”ǡ –Š‡•‡•‹–‹˜‹–› ‹• ƒŽ•‘ Ž‘™ †‡’‡†‹‰ —’‘ •‡˜‡”ƒŽ ’ƒ”ƒ‡–‡”• ™Š‹…Š ƒ”‡ ‘ˆ–‡ †‹ˆϐ‹…—Ž– –‘ …‘–”‘ŽǤ ‘‡ ‹ˆ‡…–‹‘—• ˜‹”—•‡•ǡ ‡Ǥ‰Ǥ Š‡’ƒ–‹–‹• ˜‹”—•‡•ǡ †‘‘–‰”‘™ ‹…‡ŽŽ …—Ž–—”‡ƒ† –Š—•ƒ‹‰ –Š‹•‡–Š‘†—ϐ‹– ˆ‘” …Ž‹‹…ƒŽ †‹ƒ‰‘•‹•Ǥ —‘ϐŽ—‘”‡•…‡…‡ ‹• ƒ ‘’–‹…ƒŽ ‡–Š‘† –‘ ˜‹•—ƒŽ‹œ‡ –Š‡ ˜‹”—•‡• ˆ‘” ”ƒ’‹† †‡–‡…–‹‘Ǥ –Š‹• –‡…Š‹“—‡ –Š‡ ϐŽ—‘”‡•…‡…‡ƒ…–‹˜‡ƒ–‹„‘†›‹•ƒ––ƒ…Š‡†™‹–Š•’‡…‹ϐ‹…˜‹”—•ƒ–‹‰‡• –Šƒ– ’”‘†—…‡ ϐŽ—‘”‡•…‡…‡ —†‡” Ž‹‰Š–Ǥ Š‡ ‡–Š‘† ‹• Š‹‰ŠŽ› •‡•‹–‹˜‡„—–”‡“—‹”‡†‡š–‡•‹˜‡ Žƒ„‘”™‘”ƒ†Š‹‰ŠŽ›†‡’‡†‡– ‘•ƒ’Ž‡…‘†‹–‹‘Ǥ‘‡Žƒ–‡•––‡…Š‹“—‡•ˆ‘”†‹ƒ‰‘•‹•‡Ǥ‰Ǥ ƒ†’”‘˜‹†‡Š‹‰Š•‡•‹–‹˜‹–›ƒ†Ž‘™Ǧ†‡–‡…–‹‘Ž‹‹–•…‘•—‹‰ ”‡Žƒ–‹˜‡Ž›•Š‘”––‹‡ƒ•…‘’ƒ”‡–‘‘–Š‡”‡•–ƒ„Ž‹•Š‡–Š‘†•Ǥ‡•‹†‡ –Š‡…Š‹’•ƒ”‡ƒŽ•‘ƒ˜ƒ‹Žƒ„Ž‡‹–Š‡ƒ”‡–ˆ‘”˜‹”—•†‡–‡…–‹‘ ƒ–’‹…‘‰”ƒŽ‡˜‡ŽǤ ’ƒ”–ˆ”‘–Š‡•‡‘†‡”–‡…Š‹“—‡•ǡ–Š‡”‡‹•ƒ‡‡†‘ˆƒ……—”ƒ–‡ǡ Ž‘™ …‘•–ǡ ƒ† ”ƒ’‹† †‡–‡…–‹‘ •›•–‡• ˆ‘” ˜‹”—•‡•™Š‹…Š †‘‡• ‘– ”‡“—‹”‡Š‹‰Š—•‡”‡š’‡”–‹•‡Ǥ‘‡†‹’•–‹…•ȏ͸ͻȐ‘ˆŽ‘™…‘•–ˆ‘”˜‹”—•

•…”‡‡‹‰‡Ǥ‰Ǥƒ”‡†‡˜‡Ž‘’‡†„—–‘–™‹†‡Ž›ƒ˜ƒ‹Žƒ„Ž‡ˆ‘”‘–Š‡” †ƒ‰‡”‘—• •’‡…‹‡•Ǥ Š‡ ϐŽ‘—”‹•Š‹‰ ϐ‹‡Ž† ‘ˆ ‘Ž‡…—Žƒ” ‹’”‹–‹‰ ’”‘˜‹†‡•”‡Žƒ–‹˜‡Ž›‡ƒ•›ǡƒ†•–”ƒ‹‰Š–ˆ‘”™ƒ”†™ƒ›–‘†‡•‹‰•‡•‘” …‘ƒ–‹‰• ˆ‘” ˜‹”—•‡•Ǥ —”ˆƒ…‡ ‹’”‹–‹‰ ‡–Š‘† ‹• ƒŽ”‡ƒ†› „‡‹‰ •—……‡••ˆ—Žˆ‘”‹…”‘‡–‡”‹’”‹–‹‰‘ˆ›‡ƒ•–…‡ŽŽ•ǡ”‡†„Ž‘‘†…‡ŽŽ• ƒ†ˆ‘”•‘‡„ƒ…–‡”‹ƒƒ•™‡ŽŽǤŠ‹•ƒ’’”‘ƒ…Š…ƒ„‡ˆ—”–Š‡”ƒ†˜ƒ…‡† ˆ‘”–Š‡•‡•‹‰‘ˆ—…Š•ƒŽŽ‡”•‹œ‡˜‹”—•‡•Ǥ

‘„ƒ……‘‘•ƒ‹…˜‹”—•ȋȌ™ƒ•–Š‡ϐ‹”•–˜‹”—•–Šƒ–™ƒ•…‘•‹†‡”‡† ƒ•‘†‡Ž ˆ‘”‘Ž‡…—Žƒ” ‹’”‹–‹‰Ǥ ˜‹‡™‘ˆ –Š‡ ˆƒ…– –Šƒ– ‹– Šƒ† „‡‡ ”‡ƒ‹ ‹–‡”‡•–‹‰ ˆ‘” ”‡•‡ƒ”…Š‡”• •‹…‡ –Š‡ –‹‡ ‘ˆ ‹–• †‹•…‘˜‡”›Ǥ‹•ƒ’Žƒ–‹ˆ‡…–‹‰˜‹”—•–Šƒ–Šƒ•”‘†ǦŽ‹‡•Šƒ’‡Ǥ ‘” •—”ˆƒ…‡ ‹’”‹–‹‰ƒ•—‹–ƒ„Ž‡˜‹”—••–ƒ’…ƒ„‡†‡•‹‰‡†„›•‡ŽˆǦ ƒ••‡„Ž‹‰Š‹‰ŠŽ›‘”†‡”‡†—Ž–‹Žƒ›‡”‘ˆ–Šƒ–‹•†‡’‘•‹–‡†‘ƒ ϐŽƒ–‰Žƒ•••—”ˆƒ…‡ǤŠ‡†‡•‡Ž›’ƒ…‡†•–ƒ’Šƒ•„‡‡ƒ’’Ž‹‡† ‘’‘Ž›ƒ…”›Žƒ–‡•—”ˆƒ…‡ƒ†’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ƒ•™‡ŽŽǤ—”ˆƒ…‡Ǧ‹’”‹–‡† ’‘Ž›‡”™ƒ•–‡•–‡†„›ƒ•••‡•‹–‹˜‡‡ƒ•—”‡‡–•’‡”ˆ‘”‡†‘ ͳͲœǤŠ‡ ”‡•—Ž–• ȏ͹ͲȐ •Š‘™• –Šƒ– ‹’”‹–‡† •‡•‘” Žƒ›‡” ‡šŠ‹„‹–ˆ”‡“—‡…›•Š‹ˆ–‘ˆͳ͹Ͳœ™Š‹Ž‡–Š‡‘Ǧ‹’”‹–‡†…Šƒ‡Ž •Š‘™•‘Ž›ͶͲœ•‹‰ƒŽ™Š‡‡š’‘•‡†–‘•‘Ž—–‹‘‘ˆͳͲͲ‰Ȁ Ǥ Š‡ †‹ơ‡”‡…‡ ‹†‹…ƒ–‡ –Šƒ– –Š‡ ’‘Ž›‡” •—”ˆƒ…‡ ”‡–ƒ‹ –Š‡ ‘”’Š‘Ž‘‰‹…ƒŽ ˆ‡ƒ–—”‡•‘ˆƒˆ–‡” ‹’”‹–‹‰ƒ† –Š‡”‡ˆ‘”‡…ƒ •‡Ž‡…–‹˜‡Ž› —’–ƒ‡ –Š‡ –ƒ”‰‡– ƒƒŽ›–‡ ˆ”‘ …‘’Ž‡š‹š–—”‡•Ǥ Š‡ •‡•‹–‹˜‹–›‘ˆ–Š‡Žƒ›‡”…ƒ„‡‹’”‘˜‡†„›…‘–”‘ŽŽ‹‰–Š‡‹’”‹–‹‰ •–ƒ’‘ˆǤ š’‡”‹‡–ƒŽŽ›ǡ ‹– Šƒ•„‡‡‘„•‡”˜‡† –Šƒ– ƒ—Ž–‹Žƒ›‡”‘ˆ [71] deposited on glass for stamping polymer surface produce

—…Š ‡Šƒ…‡† •‡•‘” •‹‰ƒŽ ƒ• …‘’ƒ”‡ –‘ •—„Ǧ‘‘Žƒ›‡” ƒ† Š›’‡”‘‘Žƒ›‡”ǤŠ‡Š‹‰Š‡”—„‡”‘ˆ˜‹”—•‡•‘‰Žƒ•••–ƒ’…ƒ Ž‡ƒ†–‘ƒ†‡•‡Ž›’ƒ…‡†•—”ˆƒ…‡•–”—…–—”‡ƒ†‡˜‡–—ƒŽŽ›™Š‹…Š‹• …ƒ•–‡†‘’‘Ž›‡”‹–‡”ˆƒ…‡‹ƒ‘’–‹‹œ‡†ƒŽ‹‰‡–Ǥ–Š‹•™ƒ› ˜‹”—•ƒ‰‰”‡‰ƒ–‡• ƒ”‡ ˆ‘”‡†™‹–Š‹ –Š‡ ‹’”‹–‡† …ƒ˜‹–‹‡• Ž‡ƒ†‹‰ –‘ …‘’ƒ”ƒ–‹˜‡Ž› —…Š Š‹‰Š‡” ˆ”‡“—‡…› •Š‹ˆ– ƒ• †‡•…”‹„‡† ‹ ‹‰Ǥͳ͸ǤͳͳǤŠ‡•‡•–—†‹‡••—‰‰‡•––Šƒ––Š‡Š‹‰ŠŽ›’ƒ…‡†˜‹”—••–ƒ’ ’Žƒ› ‹’‘”–ƒ– ”‘Ž‡ ‹ ‡Šƒ…‹‰ –Š‡ •‡•‘” •‹‰ƒŽǤ —ƒŽ‹–ƒ–‹˜‡ •–—†‹‡• ˆ‘”†‡–‡…–‹‘ ‹ ‹ˆ‡…–‡†’Žƒ–•Šƒ˜‡„‡‡…‘†—…–‡† ƒ†•‡•‘”•‹‰ƒŽ™ƒ•ƒ…Š‹‡˜‡†ˆ‘”ͺͲ’’‘ˆ–Š‡Ž‡ƒˆƒ••Ǥ

‹–‹ƒŽŽ›’‘Ž›ƒ…”›Žƒ–‡Šƒ†„‡‡—•‡†ˆ‘”†‡–‡…–‹‘ȏ͹ʹȐŽƒ–‡” ‘™ƒ• •—„•–‹–—–‡† „› ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ –‘ ‹’”‘˜‡ –Š‡ ‡š–”ƒ…–‹‘ ‘ˆ ˜‹”—•‡•ˆ”‘–‡•–•‘Ž—–‹‘ƒ†–Š—•—Ž–‹ƒ–‡Ž›‹’”‘˜‹‰–Š‡•‡•‘” •‹‰ƒŽǤŠ‡‘„•‡”˜‡†•‡•‘””‡•’‘•‡‘ˆ’‘Ž›ƒ…”›Žƒ–‡‹•ƒ„‘—–ʹ ͲͲœ ˆ‘”ͳͲͲ‰Ȁ•‘Ž—–‹‘™Š‡”‡ƒ•’‘Ž›—”‡–Šƒ‡›‹‡Ž†•‘˜‡”ͶͲͲ œ•‹‰ƒŽ™Š‹…Š‹•ƒŽ‘•–†‘—„Ž‡ǤŠ‡•‡Ž‡…–‹˜‹–›‘ˆ‹’”‹–‡† ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡Žƒ›‡”™ƒ•ƒŽ•‘‡šƒ‹‡†„›‡š’‘•‹‰‹––‘‘–Š‡”˜‹”—•ǡ ‹Ǥ‡ǤŠ—ƒ”Š‹‘˜‹”—•ȋȌ•‡”‘–›’‡ʹǤŠ‡•‡•‘”Žƒ›‡”‡šŠ‹„‹–• ƒ ͹Ͳ œ •‹‰ƒŽ ˆ‘” ƒ– ƒ …‘…‡–”ƒ–‹‘ ͺ ‰Ȁ™Š‡”‡ƒ• –Š‡ …Šƒ‰‡‹ˆ”‡“—‡…›‹•Œ—•–ͳͲœˆ‘”ʹ˜‹”—•ǤŠ‡•‡•‹–‹˜‹–›ƒ† •‡Ž‡…–‹˜‹–›‘ˆ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡Šƒ•„‡‡•—ƒ”‹œ‡†‹ ‹‰Ǥͳ͸ǤͳʹǤŠ‡ Š‹‰Š•‡Ž‡…–‹˜‹–›ƒ–ƒ‘•…ƒŽ‡‹•ƒ…Šƒ”ƒ…–‡”‹•–‹…‘ˆ•—”ˆƒ…‡‹’”‹–‹‰ ™Š‹…Š‹•ƒ…Š‹‡˜‡†„›‰‡‘‡–”‹…ƒŽ†‹‡•‹‘•‘ˆ…ƒ˜‹–‹‡•ƒ†•‘‡ †‹•–‹…– …Š‡‹…ƒŽ ‹–‡”ƒ…–‹‘• •—…Š ƒ• Š›†”‘‰‡ „‘†‹‰ „‡–™‡‡ Žƒ›‡”ƒ†˜‹”—•Ǥ ‘Ž‹•ƒ› et al. ȏ͹͵Ȑ Šƒ† ƒŽ•‘ ’”‘’‘•‡† ”‡Žƒ–‹˜‡Ž› ƒ †‹ơ‡”‡– ‹’”‹–‹‰‡–Š‘†ˆ‘”•‡•‹‰ǤŠ‹••–—†‹‡•‹’”‹–‡† Š›†”‘‰‡Ž• ™‡”‡ •›–Š‡•‹œ‡† „› „—Ž ‹’”‹–‹‰ ‡–Š‘†ǡ ‹Ǥ‡Ǥ ‹–”‘†—…‹‰–‡’Žƒ–‡†‹”‡…–Ž›‹–‘’”‡Ǧ’‘Ž›‡”‹œ‡†‹š–—”‡Ǥ Š‡„‹†‹‰‘ˆ˜‹”—•™‹–Š‹’”‹–‡†Š›†”‘‰‡Ž™ƒ•‘‹–‘”‡†„› ’Žƒ…‹‰–Š‡†”›’‘Ž›‡”‰‡Ž™‹–Š˜‹”—••‘Ž—–‹‘‹ƒ‹…”‘…‡–”‹ˆ—‰‡ ƒ†‹š‡†ˆ‘”ͶŠǤˆ–‡”–Šƒ––Š‡•‘Ž—–‹‘™ƒ•ϐ‹Ž–‡”‡†ƒ†–Š‡˜‹”—• …‘…‡–”ƒ–‹‘™ƒ•†‡–‡”‹‡†„›Ȁ‹••’‡…–”‘•…‘’‹…‡–Š‘†ǤŠ‡

„‹†‹‰…ƒ’ƒ…‹–›‘ˆǦ‹’”‹–‡†‰‡Ž ‹•ƒ„‘—–ʹ –‹‡•Š‹‰Š‡” ˆ‘” ˜‹”—•ƒ•…‘’ƒ”‡–‘‘Ǧ‹’”‹–‡†’‘Ž›‡”‰‡ŽǤŠ‡•‡Ž‡…–‹˜‹–› ‘ˆ–Š‡‰‡Ž™ƒ•‹˜‡•–‹‰ƒ–‡†„›‘–Š‡”…‘’‡–‹‰‘Ǧ–ƒ”‰‡–˜‹”—•ǡ‹Ǥ‡Ǥ –‘„ƒ……‘‡…”‘•‹•˜‹”—•ȋȌǤŠ‡”‡•—Ž–•ƒ”‡•Š‘™‹ƒ„Ž‡ͳ͸ǤͳǤ Š‡„‹†‹‰”‡•’‘•‡ˆ‘”‹•ƒŽ‘•–•ƒ‡„›„‘–Š‹’”‹–‡†ƒ† ‘Ǧ‹’”‹–‡†‰‡Ž‹†‹…ƒ–‹‰–Š‡”‡‹•‘•—„•–ƒ–‹ƒŽƒˆϐ‹‹–›ˆ‘” ˜‹”—•™‹–Š’‘Ž›‡”ǤŠ‡Š‹‰ŠŽ›…”‘••ǦŽ‹‡†’‘Ž›‡”›‹‡Ž†•†‡•‹‰‡† …ƒ˜‹–› •–”—…–—”‡• ˆ‘” •‡Ž‡…–‹˜‡ „‹†‹‰ ‘ˆ –‡’Žƒ–‡ ƒ• …‘’ƒ”‡ –‘ ‘–Š‡”‘Ǧ–ƒ”‰‡–‡†˜‹”—•Ǥ

Š‡”‡ˆ‘”‡ǡ –Š‡ †‹•…”‹‹ƒ–‹‘ „‡–™‡‡ †‹ơ‡”‡– •Šƒ’‡† ˜‹”—• •’‡…‹‡• …ƒ„‡ƒ†‡ –Š”‘—‰Š ‹’”‹–‡†’‘Ž›‡”‰‡ŽǤŠ‡•–—†› ‹• “—‹–‡—•‡ˆ—Ž ‹†‡˜‡Ž‘’‹‰ •‡Ž‡…–‹˜‡’‘Ž›‡”Š›†”‘‰‡Ž• ˆ‘”˜‹”—•‡• „—– –Š‡ –‹‡ ‘ˆ ’‘Ž›‡” ’”‡’ƒ”ƒ–‹‘ ƒ† –‡’Žƒ–‡ ”‡‘˜ƒŽ ‹• –‘‘ Ž‘‰ǡ‹Ǥ‡Ǥͷƒ†͵†ƒ›•ǡ”‡•’‡…–‹˜‡Ž›Ǥ–Š‡Žƒ–‡”’—„Ž‹…ƒ–‹‘ƒ—–Š‘”•

Šƒ†•–—†›–Š‡‡ơ‡…–‘ˆƒ‰‰”‡‰ƒ–‹‘„‡–™‡‡’‘Ž›‡”ƒ†˜‹”—• ƒ–†‹ơ‡”‡–…‘…‡–”ƒ–‹‘•„›‘’–‹…ƒŽ‡–Š‘†•ǤŠ‡’‘Ž›‡”„‹†‹‰ ‹–‡”ƒ…–‹‘•™‹–Š–ƒ”‰‡–˜‹”—•ƒ†‘–Š‡”•™‡”‡ƒŽ•‘‘‹–‘”‡†ǤŠ‡ ‘„–ƒ‹‡†”‡•—Ž–•ƒ”‡˜‡”›—•‡ˆ—Ž‹‘’–‹‹œ‹‰–Š‡•›–Š‡–‹…’”‘…‡†—”‡ ˆ‘”˜‹”—•‹’”‹–‹‰ȏ͹ͶȐƒ†–Š—•‰‡––‹‰—…Š‹’”‘˜‡†•‡•‹–‹˜‹–› ƒ†•‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ

—”ˆƒ…‡‹’”‹–‹‰…ƒƒŽ•‘„‡ƒ’’Ž‹‡†–‘ƒ”ƒ’‘š‘˜‹•˜‹”—•ȋ Ȍ ȏ͹ͷȐ–Šƒ–Šƒ•†‹ƒ‡–‡”‘ˆ͵ͲͲ•‹‹Žƒ”–‘„ƒ…–‡”‹ƒǤŠ‡‘—–‡”ƒ† ‹‡”…‡ŽŽ‡„”ƒ‡Žƒ›‡”…‘–ƒ‹•Ž‹“—‹†ϐ‹ŽŽ‡†Žƒ–‡”ƒŽ„‘†‹‡•–Šƒ– ƒ”‡ˆ”ƒ‰‹Ž‡–‘‡š–‡”ƒŽ’”‡••—”‡ǤŠ‡‰Žƒ•••–ƒ’‹‰‡–Š‘†‹•‘–ƒ •—‹–ƒ„Ž‡…Š‘‹…‡ƒ•‹–…ƒ†ƒƒ‰‡–Š‡•‘ˆ–‡„”ƒ‡Žƒ›‡”ƒ†–Š—• –Š‹•‡–Š‘†‡‡†•–‘„‡‘†‹ϐ‹‡†‡‡’‹‰‹‹†–Š‡ˆ”ƒ‰‹Ž‡˜‹”—• •–”—…–—”‡Ǥ Š‡’”‘„Ž‡…ƒ„‡•‘Ž˜‡†„›•‘ˆ–Ž‹–Š‘‰”ƒ’Š‹…–‡…Š‹“—‡™Š‹…Š‹• “—‹–‡•—……‡••ˆ—Ž‹ƒ–‡”‹ƒŽ•–”—…–—”‹‰ƒ†…ƒ„‡—•‡†™‹–Š‘—–ƒ› ’”‘„Ž‡•ǤŠ‡˜‹”—••–ƒ’‹•ƒ†‡‘’‘Ž›†‹‡–Š›Ž•‹Žƒ‡ȋȌ •—”ˆƒ…‡ǡ ‹Ǥ‡Ǥ ƒ •‘ˆ– •‹Ž‹…‘ •–ƒ’‹‰ •—’’‘”–Ǥ Š‹• •–ƒ’ ‹’”‹–• …ƒ„‡ƒ†‡‘’‘Ž›—”‡–Šƒ‡Žƒ›‡”…‘ƒ–‡†‘“—ƒ”–œ‹…”‘„ƒŽƒ…‡Ǥ Š‡‹’”‹–‡†Žƒ›‡”‡šŠ‹„‹–ƒ͹Ͳœ•‡•‘”•‹‰ƒŽ™Š‡”‡ƒ•–Š‡‘Ǧ ‹’”‹–‡† …Šƒ‡Ž ›‹‡Ž†• ‘Ž› ͳͲ œǤ Š‡ •—„•–ƒ–‹ƒŽ †‹ơ‡”‡…‡ „‡–™‡‡ ˆ”‡“—‡…› •Š‹ˆ–• ‹†‹…ƒ–‡• ƒ •–”‘‰ ‹’”‹–‹‰ ‡ơ‡…–Ǥ ‘”‡‘˜‡”ǡ –Š‡‘„•‡”˜‡†•‡•‘””‡•’‘•‡™ƒ• ˆ—ŽŽ›”‡˜‡”•‹„Ž‡ ˆ‘”ƒ ‰‹˜‡…‘…‡–”ƒ–‹‘‘ˆ ˜‹”—•ǤŠ‡”‡ƒ”ƒ„Ž‡ˆ‡ƒ–—”‡ƒ„‘—– •‡•‘” ‹• –Šƒ– ‹– …ƒ„‡ •—„Œ‡…–‡† ˆ‘”‘Ž‹‡‘‹–‘”‹‰’—”’‘•‡•Ǥ Š‡ƒ•• •‡•‹–‹˜‡ •–—†›™ƒ• …‘†—…–‡† „› —•‹‰ –Š”‡‡ †‹ơ‡”‡– •ƒ’Ž‡• Šƒ˜‹‰ ‡šƒ…–Ž› •ƒ‡ …‘…‡–”ƒ–‹‘ „—– †‹ơ‡”‡– •–‘”ƒ‰‡ …‘†‹–‹‘•Ǥ Š‡ •‡•‘” ”‡•’‘•‡ •Š‘™ ‹ ‹‰Ǥ ͳ͸Ǥͳ͵ ˆ‘” ƒ ˆ”‡•Š •ƒ’Ž‡ ‹•Š‹‰Š‡”„›ͶͲΨ ‹…‘’ƒ”‹•‘ –‘‘–Š‡” –™‘ •ƒ’Ž‡•–Šƒ–™‡”‡•–‘”‡†ƒ–Ͷιˆ‘”ͳ™‡‡ƒ†ƒ–”‘‘–‡’‡”ƒ–—”‡ ˆ‘”͵†ƒ›• ”‡•’‡…–‹˜‡Ž›ǤŠ‡ ”‡†—…‡†•‹‰ƒŽ• ˆ‘” Žƒ–‡” –™‘•ƒ’Ž‡• ‹†‹…ƒ–‡ƒ†‡‰”ƒ†ƒ–‹‘’”‘…‡••‘ˆ ˜‹”—•ƒ–†‹ơ‡”‡–…‘†‹–‹‘•Ǥ Š‡ •–‘”ƒ‰‡ …‘†‹–‹‘• •‹‰‹ϐ‹…ƒ–Ž› ƒơ‡…– –Š‡ ˜‹”—• ƒ…–‹˜‹–› ƒ† …ƒ—•‡–Š‡‹”†‡‰”ƒ†ƒ–‹‘ǤŠ—•ǡ–Š‡”‘„—•–‡••‘ˆ–Š‡•›–Š‡–‹…•‡•‘” Žƒ›‡”• ‰”‡ƒ–Ž› ‡š…‡‡†• –Šƒ– ‘ˆ –Š‡ „‹‘Ž‘‰‹…ƒŽ •›•–‡•ǡ ‹ –Š‹• …ƒ•‡ ˜‹”—•‡•ǤŠ‡•‡ ϐ‹†‹‰•ƒ”‡˜‡”›—•‡ˆ—Ž ‹†‡•‹‰‹‰ƒ”ƒ’‹†‘Ž‹‡ ‘‹–‘”‹‰•›•–‡–‘‡ƒ•—”‡–Š‡˜‹”—•ƒ…–‹˜‹–›Ǥ

‘Ž‡…—Žƒ”‹’”‹–‹‰‹•’”‘˜‹‰˜‡”›•—……‡••ˆ—Žƒ†”‡Ž‹ƒ„Ž‡–‘‘Žˆ‘” –Š‡ †‡–‡…–‹‘ ‘ˆ †‹ơ‡”‡– ˜‹”—•‡• –Šƒ– …ƒ—•‡ ‹ˆ‡…–‹‘• ‹ Š—ƒ• ƒ†’Žƒ–•ǤŠ‡‡–Š‘†Šƒ•„‡…‘‡‡“—ƒŽŽ›‡ơ‡…–‹˜‡ ‹†‡•‹‰‹‰ •‡•‘”ƒ–‡”‹ƒŽ ˆ‘” ƒ‹ƒŽ ˜‹”—•†‡–‡…–‹‘Ǥ –Š‹• ”‡•’‡…–ǡ „‘˜‹‡ Ž‡—‡‹ƒ˜‹”—•ȋȌ™ƒ•–Š‡ϐ‹”•–‘†‡Žƒ‹ƒŽ˜‹”—•–Šƒ–Šƒ•„‡‡ ‹’”‹–‡†ȏ͹͸Ȑƒ†…Šƒ”ƒ…–‡”‹œ‡†„›’—Ž•‡ƒ’‡”‘‡–”‹…†‡–‡…–‹‘ ȋȌ ‡–Š‘†Ǥ ‘”ƒŽŽ›ǡ ‹• ˆ‘—† ‹ Ž‹˜‡•–‘… •—…Š ƒ• …‘™• ƒ†„—ơƒŽ‘•™Š‡”‡‹–ƒ••‘…‹ƒ–‡•™‹–Š™Š‹–‡„Ž‘‘†…‡ŽŽ•ƒ††‡˜‡Ž‘’ –—‘”• ‹ Ž›’Š ‘†‡•Ǥ ‘™‡˜‡”ǡ –Š‡ ’‡”…‡–ƒ‰‡ ‘ˆ ‹ˆ‡…–‹‘• ‹• ‘–˜‡”›Š‹‰ŠǤ•›–Š‡–‹…’”‘…‡†—”‡’”‘–‡‹ǡ‹Ǥ‡Ǥ‰Ž›…‘’”‘–‡‹ ͷͳ™ƒ•–ƒ‡ƒ•–‡’Žƒ–‡ƒ†‹’”‹–‡†‹’‘Ž›’›””‘Ž‡ƒ–”‹šǤŠ‡ ‹’”‹–‡†’‘Ž›‡” ϐ‹Ž™ƒ• †‡’‘•‹–‡† ‘ ƒ ’”‡Ǧ…Ž‡ƒ‡†’Žƒ–‹— ‡Ž‡…–”‘†‡ ˆ‘”’”‘…‡‡†‹‰ƒ’‡”‘‡–”‹…‡ƒ•—”‡‡–•Ǥ‡ƒŒ‘” ’”‘„Ž‡ ‹ ‡Ž‡…–”‘…Š‡‹…ƒŽ †‡–‡…–‹‘ •›•–‡ ™ƒ• ‘Ǧ•’‡…‹ϐ‹… ‹–‡”ƒ…–‹‘•–Šƒ–†‡…”‡ƒ•‡•‡Ž‡…–‹˜‹–›ǤŠ‡…‘’‘•‹–‹‘‘ˆ‹…—„ƒ–‹‘ ‡†‹—ƒ†‹–•’•–”‘‰Ž›‹ϐŽ—‡…‡–Š‡ƒ†•‘”’–‹‘‘‡Ž‡…–”‘†‡ •—”ˆƒ…‡Ǥˆ–‡”ƒ•‡”‹‡•‘ˆ‡š’‡”‹‡–•ǡ‘’–‹ƒŽ…‘†‹–‹‘•ˆ‘””‡†—…‹‰ ‘Ǧ•’‡…‹ϐ‹…ƒ†•‘”’–‹‘Šƒ˜‡„‡‡ˆ‘—†„›‹…—„ƒ–‹‰…‘ƒ–‡† ‡Ž‡…–”‘†‡™‹–Š ͲǤͷŽ ˆ‘” ͷ‹Ǥ —……‡••‹˜‡‡ƒ•—”‡‡–• ‘ ’Žƒ–‹—‡Ž‡…–”‘†‡…ƒƒơ‡…––Š‡’”‘–‡‹•–ƒ„‹Ž‹–›ƒ†…ƒƒŽ•‘†‹•–‘”– –Š‡ …ƒ˜‹–› •–”—…–—”‡• ‘ ’‘Ž›‡” ‹–‡”ˆƒ…‡ †—”‹‰ ”‡‰‡‡”ƒ–‹‘ ’”ƒ…–‹…‡Ǥ —Ž’Š—”‹… ƒ…‹† ͳ •‘Ž—–‹‘ ’”‘˜‹†‡• ‘•– ˆƒ˜‘”ƒ„Ž‡ …‘†‹–‹‘• –‘ •‘Ž˜‡ –Š‡’”‘„Ž‡Ǥ‡•‹†‡ –Š‡‰‡‘‡–”‹…ƒŽ’”‘ϐ‹Ž‡‘ˆ

‹’”‹–‡† …ƒ˜‹–‹‡•ǡ ƒ—–Š‘”• Šƒ˜‡ ˆ‘—† •‡˜‡”ƒŽ ‘–Š‡” ’ƒ”ƒ‡–‡”• •—…Šƒ•Š›†”‘’Š‘„‹…‹–›ǡŠ›†”‘’Š‹Ž‹…‹–›ǡŠ›†”‘‰‡„‘†‹‰ƒ†’‘Žƒ” ‹–‡”ƒ…–‹‘•–Šƒ–•–”‘‰Ž›‹ϐŽ—‡…‡–Š‡•‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ

‹…‘”ƒ˜‹”—•‡• ƒ”‡ ƒ‘–Š‡” …Žƒ•• ‘ˆ ˜‹”—•‡• –Šƒ– Šƒ˜‡ „‡‡ •—……‡••ˆ—ŽŽ› ‹’”‹–‡† ‘ ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ •—”ˆƒ…‡ ƒ† †‡–‡…–‡† „› ƒ•• •‡•‹–‹˜‡ †‡˜‹…‡•Ǥ Š‡ ‘•– ™‡ŽŽǦ‘™ ‡šƒ’Ž‡ ‹• Š—ƒ ”Š‹‘˜‹”—•‡• ȋȌ –Šƒ– …ƒ—•‡ …‘‘ …‘Ž† ƒ† ˆ‘‘– ƒ†‘—–Š †‹•‡ƒ•‡˜‹”—•ȋ Ȍ ‹†‹ơ‡”‡–ƒ‹ƒŽ•ǤŠ‹‘˜‹”—•‡•”‡’”‡•‡– †‹ơ‡”‡– •‡”‘–›’‡ ˜‹”—•‡• ™Š‡”‡ ‹– Šƒ• „‡‡ ‘„•‡”˜‡† –Šƒ– –Š‡ ƒ””ƒ‰‡‡–• ‘ˆ ˜‹”—• •—”ˆƒ…‡ ’”‘–‡‹ †‹ơ‡” ˆ”‘‡ƒ…Š ‘–Š‡” ‹ ƒ •ƒ‡‡š–‡–ƒ•–Š‡›†‹ơ‡”ˆ”‘‘–Š‡”‰”‘—’˜‹”—•‡•Ǥ—…Šƒ•–”—…–—”ƒŽ †‹ơ‡”‡…‡‹ƒ•ƒ‡‰”‘—’…ƒ„‡”‡…‘‰‹œ‡†„›•›–Š‡–‹…”‡…‡’–‘”• †‡•‹‰‡† –Š”‘—‰Š ‘Ž‡…—Žƒ” ‹’”‹–‹‰Ǥ —…–‹‘ƒŽ‹œ‡† ’‘Ž›‡” •—”ˆƒ…‡•ȏ͹͹Ȑ…ƒ„‡†‡•‹‰‡†–‘’”‘˜‹†‡‘Ǧ…‘˜ƒŽ‡–ƒ†•‡Ž‡…–‹˜‡ ‹–‡”ƒ…–‹‘• ™‹–Š –Š—• ƒ’’”‡Š‡†‹‰ –Š‡ …‘…‡’– ‘ˆ ‹†‡ƒŽ ƒ”–‹ϐ‹…‹ƒŽƒ–‹„‘†‹‡•Ǥ—”ˆƒ…‡‹’”‹–‹‰‘ˆ™ƒ•ƒ……‘’Ž‹•Š‡†‘ ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡Žƒ›‡”‘ˆ•—‹–ƒ„Ž‡–Š‹…‡••ǤŠ‡’‘Ž›—”‡–Šƒ‡•—”ˆƒ…‡ ™ƒ•‘†‹ϐ‹‡† „› ’ŠŽ‘”‘‰Ž—…‹‘Ž ƒ† ’Š‡›Ž‡†‹ƒ‹‡ ‹ ‘”†‡” –‘ ’”‘–‡…––Š‡•–ƒ’˜‹”—•‡•ˆ”‘–Š‡”‡ƒ…–‹˜‡‹•‘…›ƒƒ–‡‰”‘—’•ƒ† ‡•—”‹‰ ƒ …‘’Ž‡–‡ ‘Ǧ…‘˜ƒŽ‡– ‹–‡”ƒ…–‹‘Ǥ Š‡ ‹’”‹–‡† ƒ† ‘Ǧ‹’”‹–‡†’‘Ž›‡”•—”ˆƒ…‡•™‡”‡…Šƒ”ƒ…–‡”‹œ‡†„› ’”‹‘” –‘ ƒ•• •‡•‹–‹˜‡ ‡ƒ•—”‡‡–•Ǥ Š‡ •—”ˆƒ…‡ ”‘—‰Š‡•• ‘ˆ Žƒ›‡”„‡ˆ‘”‡ƒ†ƒˆ–‡”™ƒ•Š‹‰–Š‡–‡’Žƒ–‡™ƒ•…”‹–‹…ƒŽŽ›‡šƒ‹‡†Ǥ – Šƒ† „‡‡ ‘„•‡”˜‡† –Šƒ– –Š‡ •—”ˆƒ…‡ †‹‡•‹‘• ‘ˆ …ƒ˜‹–‹‡• ƒ”‡ ˜‡”›•‹‹Žƒ”–‘•–”—…–—”ƒŽˆ‡ƒ–—”‡•ƒ‹‰‹–•—‹–ƒ„Ž‡ˆ‘”˜‹”—• ”‡…‘‰‹–‹‘ǤŠ‡‡…‘—”ƒ‰‹‰”‡•—Ž–•ˆ”‘ Šƒ†’ƒ˜‡†–Š‡™ƒ› ˆ‘”ˆ—”–Š‡”‡˜ƒŽ—ƒ–‹‰–Š‡•‡•‹–‹˜‹–›ƒ†•‡Ž‡…–‹˜‹–›‘ˆ–Š‡•—”ˆƒ…‡„› ‡ƒ•—”‡‡–•Ǥ Š‡ ‘„•‡”˜‡† ˆ”‡“—‡…› •Š‹ˆ– ˆ‘” ʹ ‹’”‹–‡† •—”ˆƒ…‡ ‹• ƒ„‘—–ͶͲͲœ™Š‹Ž‡–Š‡‘Ǧ‹’”‹–‡†‰‹˜‡•‘Ž›ͷͲœ…Šƒ‰‡ƒ–ƒ …‘…‡–”ƒ–‹‘‘ˆͳͷͲρ‰Ȁ‘ˆʹ˜‹”—•ǤŠ‡‹’”‹–‡†‡Ž‡…–”‘†‡ ›‹‡Ž†•‡ƒ”Ž›ͺ–‹‡•Š‹‰Š‡”•‡•‘”•‹‰ƒŽ–Šƒ‘Ǧ‹’”‹–‡†‘‡ ‹†‹…ƒ–‹‰ ƒ •—„•–ƒ–‹ƒŽ •‡•‹–‹˜‹–› ‘ơ‡”‡† „› •—”ˆƒ…‡ ‹’”‹–‹‰Ǥ ‡ƒ•—”‡‡– ’‡”ˆ‘”‡† ƒ– Š‹‰Š‡” …‘…‡–”ƒ–‹‘ǡ ‹Ǥ‡Ǥ ͵ͲͲ ρ‰Ȁ ‡šŠ‹„‹–• ƒ ‘ǦŽ‹‡ƒ” ”‡Žƒ–‹‘•Š‹’ ‹†‹…ƒ–‹‰ •ƒ–—”ƒ–‹‘ „‡Šƒ˜‹‘”Ǥ Š‡ –‡’‡”ƒ–—”‡ ‹ϐŽ—‡…‡ ‘ ”Š‹‘˜‹”—•‡• …ƒ ƒŽ•‘ „‡ •–—†‹‡† –Š”‘—‰Š–Š‡•‡’‘Ž›‡”‹…Žƒ›‡”•Ǥ–Šƒ•„‡‡‘–‹…‡†–Šƒ–ˆ”‡“—‡…›

…Šƒ‰‡ ‹• ‡ƒ”Ž› ŠƒŽˆ ˆ‘” •ƒ’Ž‡ Š‡ƒ–‡† ƒ– ͷͶι ƒ• …‘’ƒ”‡ –‘ —–”‡ƒ–‡† ˜‹”—• •ƒ’Ž‡Ǥ Š‡ –‡’‡”ƒ–—”‡ ‡ơ‡…– „‡…‘‡•‘”‡ ‡˜‹†‡– ™Š‡ –Š‡ ˜‹”—•‡• Š‡ƒ–‡† ƒ– ͸Ͳι ƒ• –Š‡ ˆ”‡“—‡…› •Š‹ˆ– ™ƒ• ƒŽ‘•– •ƒ‡ ˆ‘” ‹’”‹–‡† ƒ† ”‡ˆ‡”‡…‡ …Šƒ‡ŽǤ Š‹• ‹†‹…ƒ–‡•–Šƒ– –Š‡”‡™ƒ•ƒ…‘ˆ‘”ƒ–‹‘ƒŽ…Šƒ‰‡‘˜‹”—••—”ˆƒ…‡ †—‡–‘•’Ž‹––‹‰‘ơ’”‘–‡‹™Š‹…Š†‡ƒ–—”‡ƒ†ƒ‡‹–—ϐ‹–ˆ‘” ‹–‡”ƒ…–‹‰•‡Ž‡…–‹˜‡Ž›™‹–Š•—”ˆƒ…‡ǤŠ‹•„‡Šƒ˜‹‘”…ƒ„‡—•‡† –‘†‹ơ‡”‡–‹ƒ–‡„‡–™‡‡‹ˆ‡…–‹‘—•ƒ†‘‹ˆ‡…–‹‘—•˜‹”—•‡•Ǥ Š‡ †‹ơ‡”‡…‡ ‹ •—”ˆƒ…‡ ’”‘’‡”–‹‡• ‘ˆ ˜ƒ”‹‘—• •‡”‘–›’‡• …ƒ„‡‡˜ƒŽ—ƒ–‡†„›‘Ž‡…—Žƒ”‹’”‹–‹‰–‘ƒ…Š‹‡˜‡ƒ‹–”ƒ‰”‘—’ •‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ‘”†‡”–‘†‡•‹‰•—…Šƒ•‡Ž‡…–‹˜‡‘†‡ǡ–Š”‡‡†‹ơ‡”‡– ’‘Ž›‡” Žƒ›‡”• ‹’”‹–‡†™‹–Š ͳǡ ʹ ƒ† ͳͶ ˜‹”—•‡• Šƒ•„‡‡†‡•‹‰‡†ǤŠ‡•‡•‡•‘”Žƒ›‡”•™‡”‡‡š’‘•‡†–‘ƒ•’‡…‹ϐ‹… …‘…‡–”ƒ–‹‘‘ˆ–Š‡•‡†‹ơ‡”‡–•‡”‘–›’‡•ƒ†–Š‡‹””‡Žƒ–‹˜‡•‡•‘” •‹‰ƒŽ• ™‡”‡ ”‡…‘”†‡†Ǥ Š‡ ‘˜‡”ƒŽŽ …‘’ƒ”‹•‘ ‘ˆ ”‡Žƒ–‹˜‡ •‡•‘” •Š‹ˆ–• ‘ˆ –Š”‡‡ †‹ơ‡”‡– Žƒ›‡”• –‘™ƒ”†• ”‡•’‡…–‹˜‡ •‡”‘–›’‡• Šƒ• „‡‡†‡‘•–”ƒ–‡†‹ ‹‰Ǥͳ͸ǤͳͶǤ–‹•“—‹–‡‘„˜‹‘—•–Šƒ–‡ƒ…ŠŽƒ›‡” ‡šŠ‹„‹–ƒš‹—•‡•‘” •‹‰ƒŽ ˆ‘” ‹–• ‘™ ‹’”‹–‡† –‡’Žƒ–‡ ‹ …‘’ƒ”‹•‘ –‘ ‘–Š‡” ˜‹”—•‡•Ǥ Ž–Š‘—‰Š –Š‡•‡ •‡”‘–›’‡• Šƒ˜‡ ƒŽ‘•– •ƒ‡ ‰‡‘‡–”‹…ƒŽ ’”‘’‡”–‹‡• „—– ’‘••‡•• †‹ơ‡”‡– •—”ˆƒ…‡ …Šƒ”ƒ…–‡”‹•–‹…•™Š‹…Š‹•†‡–‡”‹‡†„›‹’”‹–‡†Žƒ›‡”Ǥ‘”†‡”–‘ ƒ˜‘‹†ƒ›•ƒ–—”ƒ–‹‘‡ơ‡…–•–Š‡˜‹”—••ƒ’Ž‡•‘Ž—–‹‘•™‡”‡ƒ†‡‹ ƒ†›ƒ‹…”ƒ‰‡Ǥ

Š‡…Šƒ”ƒ…–‡”‘ˆǦ‹’”‹–‡† Žƒ›‡”™ƒ• ˆ—”–Š‡” ‹˜‡•–‹‰ƒ–‡† ˆ‘”…‘’ƒ”‹‰–Š‡…”‘••Ǧ•‡•‹–‹˜‹–›™‹–Š‘–Š‡”’‹…‘”ƒ˜‹”—•‡••—…Š ƒ• Ǥšƒ…–Ž›ƒ–•ƒ‡…‘…‡–”ƒ–‹‘•ǡ–Š‡‡–ˆ”‡“—‡…›•Š‹ˆ–‹• ƒ„‘—–ʹ͹Ͳœ ˆ‘”™Š‡”‡ƒ• –Š‡…‘–‡†‹‰ ˜‹”—•›‹‡Ž†• ‘Ž›͵ͷœƒ••Š‘™‹ ‹‰Ǥͳ͸ǤͳͷǤŠ‡ƒ•–‘‹•Š‹‰‹–‡”‰”‘—’ƒ† ‹–”ƒ‰”‘—’•‡Ž‡…–‹˜‹–›Šƒ•„‡‡ƒ––ƒ‹‡†–Š”‘—‰Š•—”ˆƒ…‡Ǧ‹’”‹–‡† ’‘Ž›—”‡–Šƒ‡ ‹ …‘„‹ƒ–‹‘ ™‹–Š ƒ…‘—•–‹… †‡˜‹…‡•Ǥ Š‡ •–—†› ‹• ˜‡”› ˜ƒŽ—ƒ„Ž‡ ‹ †‡•‹‰‹‰ ƒ ‹†‡ƒŽ •‡•‹‰ ’Žƒ–ˆ‘” ˆ‘” †‹ơ‡”‡– ˜‹”—••’‡…‹‡•™‹–Š…‘•‹†‡”ƒ„Ž‡•‡Ž‡…–‹˜‹–›Ǥ

‡‰—‡˜‹”—•‹••—’’‘•‡†–‘„‡ƒ•‡”‹‘—•ƒ”–Š”‘’‘†Ǧ„‘”‡†‹•‡ƒ•‡ that has potential health threats to human life in tropical parts of the

™‘”Ž†ǤŠ‡†‡‰—‡ˆ‡˜‡”Šƒ†ƒ’’‡ƒ”‡†ƒ‡†‡‹…˜‹”ƒŽ†‹•‡ƒ•‡‹ ‘”‡–ŠƒͳͲͲ…‘—–”‹‡•™Š‡”‡ƒŽ‘•–‹ŽŽ‹‘•‘ˆ’‡‘’Ž‡ƒ”‡‹ˆ‡…–‡† „›–Š‹•˜‹”—•Ǥ‡ơ‡…–‹˜‡ƒ†ƒ’’”‘˜‡††‡‰—‡˜‹”—•˜ƒ……‹‡‹•‘– ƒ˜ƒ‹Žƒ„Ž‡‹–Š‡ƒ”‡–—Ž‹‡•‘‡‘–Š‡”˜‹”—•‡•Ǥ

Š‡”‡ˆ‘”‡ǡ ƒ ”ƒ’‹† †‡–‡…–‹‘ •›•–‡ ‹• ‡‡†‡† ˆ‘” ”‡…‘‰‹œ‹‰ †‡‰—‡ ˜‹”—• ‹ˆ‡…–‹‘• ™‹–Š‘—– ƒ› ’”‡–”‡ƒ–‡– ‘ˆ •ƒ’Ž‡Ǥ ”‡Žƒ–‹˜‡Ž›‘˜‡Ž†‡–‡…–‹‘‡–Š‘†Šƒ•„‡‡”‡’‘”–‡†„›ƒ‹et al. [34] †‡˜‡Ž‘’‹‰ƒ‡’‹–‘’‡Ǧ‡†‹ƒ–‡†‹’”‹–‹‰ƒ’’”‘ƒ…Šƒ•†‡•…”‹„‡† ‹ ‹‰Ǥͳ͸Ǥͳ͸Ǥ •–‡ƒ†‘ˆ—•‹‰™Š‘Ž‡‹…”‘‘”‰ƒ‹•ƒ•ƒ –‡’Žƒ–‡ ‹ ‹’”‹–‹‰’”‘…‡••ǡƒ’ƒ”–‹…—Žƒ”’”‘–‡‹•‡“—‡…‡ ‹• ‹–”‘†—…‡† –Šƒ–•’‡…‹ϐ‹…ƒŽŽ› ‹–‡”ƒ…– –‘ –Š‡ –ƒ”‰‡–˜‹”—•ǤŠ‡„‹†‹‰ƒ’’”‘ƒ…Š ‹••‘‡™Šƒ–•‹‹Žƒ”–‘ƒ–—”ƒŽƒ–‹„‘†‹‡•™Š‡”‡‘Ž›ƒŽ‹––Ž‡•‡…–‹‘ ‹–‡”ƒ…–•™‹–Šƒ–‹‰‡•Ǥ–Š‹•‡–Š‘†ǡƒ’‡–ƒ†‡…ƒ’‡’–‹†‡‹•†‹”‡…–Ž› ‹’”‹–‡†™‹–Š’‘Ž›ƒ…”›Ž‹…ƒ…‹†ƒ†ƒ˜‡”›ϐ‹‡ϐ‹Ž‹•†‡’‘•‹–‡†‘ ‰‘Ž†Ǧ…‘ƒ–‡†Ǥ ˆƒ…– –Š‹•ͳͷǦ‡”’‡’–‹†‡ ‹• …‘•‹†‡”‡†ƒ• –Š‡ ‡’‹–‘’‡‘ˆ†‡‰—‡˜‹”—•’”‘–‡‹ǡ‹Ǥ‡Ǥ‘Ǧ•–”—…–—”ƒŽ’”‘–‡‹ͳȋͳȌǤ Š‡‹’”‹–‡†Žƒ›‡”™ƒ•™ƒ•Š‡†™‹–Š’Š‘•’Šƒ–‡„—ơ‡”–‘†‹•…ƒ”† –‡’Žƒ–‡ „‡ˆ‘”‡ ’‡”ˆ‘”‹‰ ƒ•• •‡•‹–‹˜‡ ‡ƒ•—”‡‡–•Ǥ Š‡ „‹†‹‰‘ˆͳƒ†–Š‡–‡’Žƒ–‡’‡’–‹†‡™‹–Š‹’”‹–‡†•—”ˆƒ…‡ ™ƒ•–‡•–‡†„›‡š’‘•‹‰‹–•†‹ơ‡”‡–…‘…‡–”ƒ–‹‘•ƒ†‡ƒ•—”‹‰ –Š‡…‘””‡•’‘†‹‰ˆ”‡“—‡…›•Š‹ˆ–Ǥ‹‰‹ϐ‹…ƒ–ˆ”‡“—‡…›•‹‰ƒŽ™ƒ• ‘„•‡”˜‡†–Šƒ–•Š‘™•‡Šƒ…‡†‘Ž‡…—Žƒ””‡…‘‰‹–‹‘„‘–Š ˆ‘”–Š‡ –‡’Žƒ–‡ƒ†–Š‡ƒƒŽ›–‡’”‘–‡‹‹…‘’ƒ”‹•‘–‘”‡ˆ‡”‡…‡Žƒ›‡”Ǥ ˆ–‡”’”‘–‡‹„‹†‹‰–Š‡Žƒ›‡”…ƒ„‡™ƒ•Š‡†„›ƒ…‡–‹…ƒ…‹†‹š–—”‡ –‘”‡—•‡–Š‡•‡–—’ˆ‘”•‡˜‡”ƒŽ‡ƒ•—”‡‡–•™Š‹…Š‹•ƒ’’”‡…‹ƒ„Ž‡Ǥ

Š‡ „‹†‹‰ „‡Šƒ˜‹‘” ‘ˆ –Š‡ ‹’”‹–‡† Žƒ›‡” ™ƒ• ˆ—”–Š‡” ‡˜ƒŽ—ƒ–‡† –Š”‘—‰Š‹‡–‹… •–—†‹‡•Ǥ –Š‹•‡–Š‘† –Š‡†‹••‘…‹ƒ–‹‘

…‘•–ƒ–•ˆ‘”ͳͷǦ‡”’‡’–‹†‡ǡͳ’”‘–‡‹ƒ†ƒ‘–Š‡”ƒ–‹„‘†›™ƒ• …ƒŽ…—Žƒ–‡†™‹–Š‹–‡”ˆƒ…‡Ǥͳ’”‘–‡‹™ƒ••ƒ†™‹…Š‡†„‡–™‡‡ ‡’‹–‘’‡’‡’–‹†‡ ‹’”‹–‡†•—”ˆƒ…‡ƒ†„›‘‘…Ž‘ƒŽƒ–‹„‘†›ƒ• –Š‡›„‘–Š„‹†‹ƒ•ƒ‡”‡‰‹‘ǤŠ‡•…Š‡ƒ–‹…†‹ƒ‰”ƒ‘ˆ‡’‹–‘’‡ ‹’”‹–‹‰†‡‘•–”ƒ–‡••—…Š„‹†‹‰ǤŠ‡”‡•—Ž–•‹†‹…ƒ–‡ƒ•–”‘‰ „‹†‹‰ ƒ••‘…‹ƒ–‹‘ „‡–™‡‡ Žƒ›‡” ƒ† –Š‡ͳ†‡‰—‡ ˜‹”—• ’”‘–‡‹Ǥ‡†—…‡†•‹œ‡‘ˆ–Š‡–‡’Žƒ–‡…”‡ƒ–‡•—‡”‘—•‹–‡”ƒ…–‹‘ •‹–‡•ˆ‘”˜‹”—•’”‘–‡‹”‡…‘‰‹–‹‘Ǥ‰‡‡”ƒŽǡ–Š‡‡’‹–‘’‡Ǧ‡†‹ƒ–‡† ‹’”‹–‹‰‡–Š‘† ‹•“—‹–‡—•‡ˆ—Ž ˆ‘”†‡–‡…–‹‰†‡‰—‡˜‹”—•™‹–Š Š‹‰Š •‡•‹–‹˜‹–› ƒ† •’‡…‹ϐ‹…‹–›Ǥ Š‡ ”‡ƒ”ƒ„Ž‡ ˆ‡ƒ–—”‡ ‹• –Šƒ– ‡ƒ•—”‹‰ •›•–‡†‘‡• ‘– ”‡“—‹”‡ ƒ ’”‡–”‡ƒ–‡– ‘ˆ •ƒ’Ž‡ǡ ‹Ǥ‡Ǥ •‡’ƒ”ƒ–‹‘ƒ†’—”‹ϐ‹…ƒ–‹‘•–‡’•–Šƒ–…‘•—‡…‘•‹†‡”ƒ„Ž‡ –‹‡Ǥ ƒ•••‡•‹–‹˜‡‡ƒ•—”‡‡–•›‹‡Ž†”ƒ’‹†”‡•—Ž–•ˆ‘”’”‘–‡‹„‹†‹‰ ™‹–Š•‡•‘”Žƒ›‡”–Šƒ–‹•˜‡”›’”‘‹•‹‰ˆ‘”†‡•‹‰‹‰ˆƒ•–†‡–‡…–‹‘ •›•–‡•Ǥ—–Š‘”•ˆ—”–Š‡”‡š–‡†‡†–Š‡‹”•–—†‹‡•ˆ‘”…Ž‹‹…ƒŽ†‹ƒ‰‘•‹• ‘ˆ†‡‰—‡˜‹”—•ȏ͹ͺȐ—•‹‰Žƒ›‡”‹…‘„‹ƒ–‹‘™‹–Šƒ…‘—•–‹… †‡˜‹…‡•ǤŠ‡›Šƒ†•—……‡••ˆ—ŽŽ›‡ƒ•—”‡–Š‡˜‹”—•ˆ”‘ƒ‹ˆ‡…–‡† sample in less than 1 h of the reported case and these sensor results

™‡”‡˜ƒŽ‹†ƒ–‡†„›Ǥ–Š‡”†‡‰—‡˜‹”—••‡”‘–›’‡•…ƒƒŽ•‘„‡ †‡–‡…–‡†–Š”‘—‰Š–Š‹•‡™‡”‡–Š‘†Ǥ

‡…‡–Ž›ǡǤƒ‰et al. ȏ͹ͻȐŠƒ†‡”‰‡†–™‘†‹ơ‡”‡– –‡…Š‹“—‡•ǡ ‹Ǥ‡Ǥ ‘Ž‡…—Žƒ” ‹’”‹–‹‰ ƒ† ˆ‘” †‡•‹‰‹‰ •‡•‘” •—”ˆƒ…‡Ǥ ”‹…‹’ƒŽŽ›ǡ–Š‡‰‘Ž†•—”ˆƒ…‡‘ˆ•‹Ž‹…‘…Š‹’‹•–”‡ƒ–‡†™‹–Š–Š‹‘Ž•‹ –Š‡’”‡•‡…‡‘ˆ–Š‡–‡’Žƒ–‡–‘„‡‹’”‹–‡†Ǥ‡‘˜ƒŽ‘ˆ–‡’Žƒ–‡ ™‹ŽŽ’”‘†—…‡ƒϐ‹‡‘‘Žƒ›‡”‘‰‘Ž†•—”ˆƒ…‡„›…‘˜ƒŽ‡–„‘†‹‰ ‘ˆƒŽƒ‡–Š‹‘Ž•™‹–ŠŠ›†”‘š›Ž‰”‘—’Šƒ˜‹‰ ‹’”‹–‹‰ ˆ‡ƒ–—”‡•Ǥ –Š‹• •–”ƒ–‡‰› –Š‡ •‡•‘” ‹–‡”ˆƒ…‡’”‘˜‹†‡• •—‹–ƒ„Ž‡ ƒˆϐ‹Ž‹ƒ–‹‘• ˆ‘” •‹œ‡ǡ •Šƒ’‡ǡ ƒ† ‘–Š‡” Š›†”‘’Š‘„‹… ‹–‡”ƒ…–‹‘• ‘ˆ –Š‡ –‡’Žƒ–‡Ǥ Š‡†‡•‹‰‡†•‡•‘”•—”ˆƒ…‡™ƒ•…Šƒ”ƒ…–‡”‹œ‡†„› ƒ†‰”ƒœ‹‰ ƒ‰Ž‡ Ǧ •’‡…–”‘•…‘’› –Šƒ– ‹†‹…ƒ–‡• –Š‡ ˆ‘”ƒ–‹‘ ‘ˆ Š‹‰ŠŽ› ‘”‰ƒ‹œ‡†‹’”‹–‡†‘‘Žƒ›‡”Ǥ—–Š‘”•Šƒ†—•‡†–Š‡•‡•—”ˆƒ…‡•ˆ‘” ’‘–‡–‹‘‡–”‹…•‡•‹‰‘ˆ’”‘–‡‹ƒ†’‘Ž‹‘˜‹”—•Ǥ ‘Ž‹‘˜‹”—• ‹•ƒ’‘•‹–‹˜‡•–”ƒ†˜‹”—• –Šƒ–‡–‡”• ‹Š—ƒ „‘†› –Š”‘—‰Š †‹‰‡•–‹˜‡ ”‘—–‡ ƒ† –”ƒ˜‡Ž‹‰ –Š”‘—‰Š „Ž‘‘† ƒ––ƒ…• ‘ ‡—”‘ …‡ŽŽ•Ǥ Š‡”‡ ‹– ”‡’Ž‹…ƒ–‡• ˜‡”› “—‹…Ž› –Šƒ– †‹•”—’– –Š‡ ˆ—…–‹‘• ‘ˆ ‡—”‘ …‡ŽŽ•Ǥ Š‡ †‡˜‡Ž‘’‡† ’‘–‡–‹‘‡–”‹… ‡ƒ•—”‡‡–•†‡‘•–”ƒ–‡ƒ Ž‹‡ƒ””‡Žƒ–‹‘™‹–Š‹…”‡ƒ•‹‰˜‹”—•

…‘…‡–”ƒ–‹‘ ‘˜‡” ƒ ™‹†‡ ”ƒ‰‡Ǥ Š‡ ‘Ǧ‹’”‹–‡† ”‡ˆ‡”‡…‡ ‡Ž‡…–”‘†‡†‘‡•‘–•Š‘™ƒ›ƒ’’”‡…‹ƒ„Ž‡…Šƒ‰‡‹•‡•‘””‡•’‘•‡ —’‘ ‡š’‘•‹‰ †‹ơ‡”‡– ’‘Ž‹‘˜‹”—• …‘…‡–”ƒ–‹‘Ǥ Š‡ •’‡…‹ϐ‹…‹–› ‘ˆ –Š‡ ‹’”‹–‡† ‡Ž‡…–”‘†‡ ™ƒ• ƒŽ•‘ –‡•–‡† „› ”—‹‰ †‹ơ‡”‡– ƒ†‡‘˜‹”—• •ƒ’Ž‡• ‘ˆ ‡šƒ…–Ž› •ƒ‡ …‘…‡–”ƒ–‹‘•Ǥ Š‡ ”‡•—Ž–• •—ƒ”‹œ‡†‹ ‹‰Ǥͳ͸Ǥͳ͹‹†‹…ƒ–‡–Šƒ––Š‡”‡‹•˜‹”–—ƒŽŽ›‘…Šƒ‰‡ ‹–Š‡‡Ž‡…–”‹…’‘–‡–‹ƒŽ‘ˆ•‡•‘”‡Ž‡…–”‘†‡ˆ‘”ƒ†‡‘˜‹”—••‘Ž—–‹‘Ǥ Š‡‡–Š‘† ‹•“—‹–‡—•‡ˆ—Ž ƒ†…ƒ„‡ ˆ—”–Š‡” •–—†‹‡† ˆ‘” …Ž‹‹…ƒŽ †‹ƒ‰‘•‹•‘ˆ’‘Ž‹‘˜‹”—•Ǥ

ƒ’‹††‡–‡…–‹‘‘ˆ˜ƒ”‹‘—•˜‹”ƒŽ•’‡…‹‡•™‹–ŠŽ‘™Ǧ…‘•–‹‹ƒ–—”‹œ‡† †‡˜‹…‡•‹•ƒ…ŠƒŽŽ‡‰‹‰–ƒ•ˆ‘””‡•‡ƒ”…Š‡”•ǤŠ‡Žƒ„‘ƒ…Š‹’ȋȌ ‘”‹…”‘–‘–ƒŽƒƒŽ›•‹••›•–‡ȋρȌ†‡Ž‹˜‡”•–Š‹•…‘…‡’–ˆ‘”˜‹”—• •‡•‹‰ǤŠ‡•ƒŽŽ•‹œ‡ǡŽ‘™•ƒ’Ž‡˜‘Ž—‡ǡƒ†Š‹‰Š‡ˆϐ‹…‹‡…›™‹–Š ˆƒ•–‡”ƒƒŽ›•‹•ƒ”‡‘•–ƒ––”ƒ…–‹˜‡’ƒ”–•‘ˆ–Š‡•‡‹…”‘•‡•‘”•Ǥ—…Š †‡–‡…–‹‘ •›•–‡• ƒ”‡ Š‹‰ŠŽ› †‡•‹”ƒ„Ž‡ ‹ ‘”†‡” –‘ ƒ‡ ’”‘’– †‹ƒ‰‘•–‹… †‡…‹•‹‘•Ǥ ‘Ž‡…—Žƒ” ‹’”‹–‡† ’‘Ž›‡”• Šƒ˜‡ „‡‡

†‡’‘•‹–‡†‘ƒ‹…”‘ϐŽ—‹†‹…„‹‘…Š‹’ˆ‘”˜‹”ƒŽ†‡–‡…–‹‘—•‹‰†‹‡Ž‡…–”‹… ‹…”‘•‡•‘”•ȏͺͲȐǤŠ‡…Š‡‹…ƒŽ‹–‡”ˆƒ…‡ǡ‹Ǥ‡Ǥ’”‘˜‹†‡•†‡•‹”‡† •‡Ž‡…–‹˜‹–›™Š‹Ž‡ †‹‡Ž‡…–”‹…‡ƒ•—”‡‡–• …ƒ’–—”‡ –Š‡ ”‡…‘‰‹–‹‘ ‡˜‡–Ǥ Š‡ ‡Ž‡…–”‹…ƒŽ ’”‘’‡”–‹‡• ‘ˆ ˜ƒ”‹‘—• ‹…”‘‘”‰ƒ‹•• Šƒ˜‡ ƒŽ”‡ƒ†› „‡‡ •–—†‹‡† „› †‹ơ‡”‡– ‡–Š‘†• ‹…Ž—†‹‰ †‹‡Ž‡…–”‹… •’‡…–”‘•…‘’›ǡ‡Ž‡…–”‘’Š‘”‡•‹•ǡƒ†•‘‡‘–Š‡”…ƒ’ƒ…‹–‹˜‡‡–Š‘†•Ǥ –Š‹••…Š‡‡ǡ‹–‡”†‹‰‹–ƒŽ…ƒ’ƒ…‹–‘”ȋȌ•–”—…–—”‡‹•ˆƒ„”‹…ƒ–‡† ‘•—„•–”ƒ–‡•—”ˆƒ…‡™Š‡”‡ƒ•–Š‡•‡‡Ž‡…–”‘†‡•ƒ”‡…‘˜‡”‡†„›ƒ ϐ‹‡Žƒ›‡”ǤŠ‡‘•–„‡‡ϐ‹…‹ƒŽƒ•’‡…–‘ˆ—•‹‰•‹•–Šƒ––Š‡› ”‡†—…‡ –Š‡ ‡š–‡– ‘ˆ ‹–‡”ˆ‡”‹‰ ’ƒ”ƒ‡–‡”• ƒ† ‹ –Š‹• ™ƒ› –Š‡ —•’‡…‹ϐ‹…ƒ†•‘”’–‹‘…ƒ„‡ƒ˜‘‹†‡†ǤŠ‡„‹†‹‰‘ˆ–ƒ”‰‡–˜‹”—•‘ •—”ˆƒ…‡…Šƒ‰‡•–Š‡†‹‡Ž‡…–”‹…’”‘’‡”–‹‡•™Š‹…Šƒ”‡‡ƒ•—”‡† „› ‹…”‘ •‡•‘”•Ǥ ‡•‹†‡ –Š‡ ƒ…–—ƒŽ ‡ƒ•—”‹‰ …Šƒ‡Žǡ ‘‡ ”‡ˆ‡”‡…‡ …Šƒ‡Ž ™ƒ• ƒŽ•‘ ‹–‡‰”ƒ–‡† ‘‹…”‘ …Š‹’Ǥ Š‡ ‘˜‡”ƒŽŽ †‡•‹‰ …‘–ƒ‹• –™‘ …Šƒ‡Ž• ™‹–Š ˆ‘—” …‘–ƒ…–Ž‡•• †‹‡Ž‡…–”‹… ‹…”‘•‡•‘”•–Šƒ–‡•—”‡…‘–‹—‘—•‘‹–‘”‹‰‘ˆ˜‹”—•„‹†‹‰–‘ Ǥ™‘†‹ơ‡”‡–…Žƒ••‡•‘ˆ˜‹”—•‡•ǡ‹Ǥ‡Ǥƒ†™‡”‡—•‡†ƒ• ‘†‡Ž•ˆ‘”•‡•‹‰ǤŠ‡‘„–ƒ‹‡†”‡•—Ž–••Š‘™ƒŠ‹‰Š•‡•‹–‹˜‹–›ƒ† •‡Ž‡…–‹˜‹–›’”‘˜‹†‡†„›–Š‹••‡–—’ƒ†ƒ‹‰•‹‰‹ϐ‹…ƒ–Ž›•Š‘”–‡” ”‡•’‘•‡ –‹‡Ǥ Š‡ ”‡—•ƒ„‹Ž‹–› ‘ˆ –Š‡ †‡˜‹…‡ ƒ‡• ‹– ‹†‡ƒŽ ˆ‘” •…”‡‡‹‰‘ˆ˜‹”ƒŽ…‘–ƒ‹ƒ–‹‘™Š‹…Š‹•…‘•‹†‡”ƒ„Ž‡ˆ‘”‹’”‘˜‹‰ –Š‡’—„Ž‹…Š‡ƒŽ–Š•‡…—”‹–›Ǥ

‘Ž‡…—Žƒ” ‹’”‹–‡† •›–Š‡–‹… ƒ–‡”‹ƒŽ• Šƒ˜‡ ‹–”‘†—…‡† –Š‡•‡Ž˜‡• ƒ• ƒ •–”‘‰ …‘–‡†‡”‘ˆƒ–—”ƒŽ ƒ–‹„‘†‹‡• ‹ ”‡•’‡…– ‘ˆ•‡•‹‰ƒ’’Ž‹…ƒ–‹‘•ǤŠ‡‹”˜‡”•ƒ–‹Ž‹–›‹†‡•‹‰‹‰•‡•‘”Žƒ›‡”• ˆ‘”˜ƒ”‹‘—•‹…”‘‘”‰ƒ‹••ƒ†˜‹”—•‡•Šƒ•ƒ†‡–Š‡ƒ†ƒ’–ƒ„Ž‡ ™‹–Š †‹ơ‡”‡– –”ƒ•†—…‡”• ‹…Ž—†‹‰ ‘’–‹…ƒŽǡ ‡Ž‡…–”‘…Š‡‹…ƒŽǡ ƒ† ƒ…‘—•–‹… †‡˜‹…‡•Ǥ Š‡•‡ •›–Š‡–‹… …‘ƒ–‹‰ ƒ–‡”‹ƒŽ• •‡Ž‡…–‹˜‡Ž› ‡š–”ƒ…– –Š‡ –ƒ”‰‡– ƒƒŽ›–‡ǡ ‡Ǥ‰Ǥ ˜‹”—•‡• ƒ† „ƒ…–‡”‹ƒ ƒ˜‘‹†‹‰ ƒ› —•’‡…‹ϐ‹…ƒ••‘…‹ƒ–‹‘•ǤŽ‹‡–Š‡ƒ–—”ƒŽ”‡…‡’–‘”•–Š‡‹–‡”ƒ…–‹‘• ‹•”‡˜‡”•‹„Ž‡™Š‹…Šƒ‡•–Š‡”‡—•ƒ„‹Ž‹–›‘ˆ–Š‡ƒ–‡”‹ƒŽƒ†’”‘˜‹†‡• Ž‘‰Ǧ–‡”•–ƒ„‹Ž‹–›Ǥ‰‡‡”ƒŽǡ‘Ž‡…—Žƒ”‹’”‹–‹‰…ƒ„‡—•‡†ƒ• ƒƒŒ‘”•‡•‹‰–‘‘Žˆ‘”–Š‡”‡…‘‰‹–‹‘•‘ˆƒŽŽ‹…”‘Ǧƒ†ƒ‘Ǧ•‹œ‡ Ž‹˜‹‰‘”‰ƒ‹••Ǥ Š‡ •‡•‹‰ ƒ–‡”‹ƒŽ• ƒ† –”ƒ•†—…‡” †‡˜‹…‡• „‘–Š …ƒ „‡ ‘’–‹‹œ‡†–‘†‡•‹‰‘”‡”‘„—•–ǡ•‡•‹–‹˜‡ǡƒ†•‡Ž‡…–‹˜‡†‡–‡…–‹‘

•›•–‡• ˆ‘” „”‘ƒ†‡‹‰ –Š‡ •…‘’‡ ‘ˆ „‹‘•‡•‘”•Ǥ Š‡ •›–Š‡–‹… ƒ–‡”‹ƒŽ• †‡•‹‰‡† „›‘Ž‡…—Žƒ” ‹’”‹–‹‰ …ƒ „‡ ‘’–‹‹œ‡† „› ƒ†Œ—•–‹‰–Š‡‘‘‡”…”‘••ǦŽ‹‡””ƒ–‹‘ǡ•—‹–ƒ„Ž‡–‡’‡”ƒ–—”‡ƒ† ‘–Š‡” ”‡ƒ…–‹‘ …‘†‹–‹‘• ȏͺͳȐǤ ƒ‹‰ –Š‡ •—”ˆƒ…‡ ‹’”‹–‹‰ ‹–‘ ƒ……‘—–ǡ‘”‡†‡•‡Ž›’ƒ…‡†ǡƒ†‘”†‡”‡†•–ƒ’•…ƒ„‡ƒ†‡•‘ –Šƒ– –‡’Žƒ–‡ …ƒ•–‡† ‹ƒ‰‡’”‘†—…‡ƒš‹——„‡” ‘ˆ ƒƒŽ›–‡ ‹–‡”ƒ…–‹‘ •‹–‡•Ǥ Š‹• ™‹ŽŽ ƒŽ•‘ ”‡†—…‡ –Š‡ —•’‡…‹ϐ‹… „‹†‹‰ ‘ˆ ‘–Š‡” ‹–‡”ˆ‡”‹‰ •—„•–ƒ…‡•Ǣ –Š—•ǡ ‹–™‘—Ž† „‡ ’‘••‹„Ž‡ –‘ †‡•‹‰ ‘”‡ •‡Ž‡…–‹˜‡„‹†‹‰ •›•–‡•ƒ† Ž‘™‡”‹‰ –Š‡†‡–‡…–‹‘ Ž‹‹–•Ǥ Š‡…‘’ƒ–‹„‹Ž‹–›‹••—‡•‘ˆ–Š‡’‘Ž›‡”•›•–‡™‹–ŠƒƒŽ›–‡•—…Šƒ• Š›†”‘’Š‹Ž‹…‹–›ǡŠ›†”‘’Š‘„‹…‹–›ƒ†‘–Š‡”ƒˆϐ‹‹–›‹–‡”ƒ…–‹‘••Š‘—Ž† ƒŽ•‘„‡…‘•‹†‡”‡†ƒ•–Š‡›ƒŽ•‘’Žƒ›•ƒ˜‹–ƒŽ”‘Ž‡‹”‡…‘‰‹–‹‘Ǥ Š‡•‡•‹–‹˜‹–›‘ˆ–Š‡•›•–‡‹•ƒ––”‹„—–‡†–‘–Š‡†‡•‹‰ƒ†•‹‰ƒŽ ƒ’Ž‹ϐ‹…ƒ–‹‘‘ˆ–”ƒ•†—…‡”†‡˜‹…‡™Š‹…Š…ƒƒŽ•‘„‡‘’–‹‹œ‡†Ǥ’ƒ”– ˆ”‘–Š‡•‡•–”ƒ–‡‰‹‡•ǡ–Š‡–”ƒ•†—…‡”‹–‡”ˆƒ…‡•Š‘—Ž†„‡†‡•‹‰‡† ˆ‘”—Ž–‹Ǧ•‡•‹‰‘ˆ‘”‡–Šƒ‘‡ƒƒŽ›–‡‡‡’‹‰–Š‡•‹œ‡‘ˆ–Š‡ †‡˜‹…‡…‘•–ƒ–Ǥ‡•—…Š‡šƒ’Ž‡Šƒ•ƒŽ”‡ƒ†›„‡‡‡–‹‘‡†ˆ‘” –Š‡•‡•‹‰‘ˆ•‹‰Ž‡–ƒ††—’Ž‡š›‡ƒ•–…‡ŽŽ•‘ƒ•‹‰Ž‡ǤŠ‹• •‡–—’…‘—Ž†„‡ƒ’’Ž‹‡†ˆ‘”–Š‡†‡–‡…–‹‘‘ˆ–™‘•‹‹Žƒ”‘”†‹ơ‡”‡– …‡ŽŽ …ƒ–‡‰‘”‹‡•ǡ ‡Ǥ‰Ǥ „ƒ…–‡”‹ƒǡ ‡”›–Š”‘…›–‡• ƒ† ‘–Š‡”•Ǥ –™‘—Ž† „‡ ƒ†˜ƒ–ƒ‰‡‘—• –‘’‡”ˆ‘”—Ž–‹Ǧ•‡•‘”‡ƒ•—”‡‡–•‘ˆ …‡ŽŽ• ƒ† ˜‹”—•‡•‘ƒ•‹‰Ž‡…Š‹’ǤŠ‹•™‘—Ž†”‡†—…‡–Š‡ƒƒŽ›•‹•…‘•–ƒ†–‹‡ ™Š‹…Š‹•“—‹–‡•—‹–ƒ„Ž‡ˆ‘””ƒ’‹†•…”‡‡‹‰’—”’‘•‡•Ǥ‹‹ƒ–—”‹œƒ–‹‘ ‘ˆ–Š‡•‡•‘”†‡˜‹…‡‹•ƒ‡›’‘‹–‹‘”†‡”–‘ƒ‡–Š‡’‘”–ƒ„Ž‡ ƒ†…‘’‡–‹–‘”–‘‘–Š‡”ƒ••ƒ›•…Š‡‡••—…Šƒ•ƒ†ǤŠ‡ ”‡…‡–ƒ…–‹˜‹–›‹–Š‹•”‡‰ƒ”†Šƒ•„‡‡†‘‡ˆ‘”–Š‡•‡•‹‰‘ˆ ƒ†˜‹”—•‡•†‡–‡…–‹‘—•‹‰…‘–ƒ…–Ž‡••‹…”‘•‡•‘”•„‹‘…Š‹’•Ǥ Š‹••‡–—’Šƒ•–Š‡•‹œ‡‘ˆˆ‡™…‡–‹‡–‡”•™Š‹…Š‹•”‡ƒŽŽ›‹–‡”‡•–‹‰ ƒ†Šƒ•ˆƒ•–‡””‡•’‘•‡–‹‡–ŠƒǤŠ‡…‘’Ž‡–‡”‡˜‡”•‹„‹Ž‹–› ‘ˆ ”‡…‡’–‘”•ƒ‡• •—…Š •›•–‡• ”‡—•ƒ„Ž‡ –Š—• ’”‘˜‹†‹‰ ƒ ‹†‡ƒŽ†‡–‡…–‹‘•›•–‡™‹–Š…‘’ƒ”ƒ–‹˜‡Ž›Ž‘™’”‹…‡Ǥ Š‡ •‘Ž‡ ‘„Œ‡…–‹˜‡ ‘ˆ –Š‹• •–—†› ‹• –‘ —†‡”•–ƒ† –Š‡ ™‘”‹‰ ’”‹…‹’Ž‡ǡ‹’Ž‡‡–ƒ–‹‘ǡƒ†ƒ†˜ƒ–ƒ‰‡•‘ˆ‘˜‡Ž•‡•‘”•ˆ‘” †‡–‡…–‹‘‘ˆ˜ƒ”‹‘—•‘”‰ƒ‹••Ǥ

™‘—Ž†Ž‹‡–‘ƒ…‘™Ž‡†‰‡‹‰Š‡”†—…ƒ–‹‘‘‹••‹‘ƒ‹•–ƒ ˆ‘”’”‘˜‹†‹‰ˆ—†‹‰ˆ‘”Š•–—†‹‡•ƒ–‹˜‡”•‹–›‘ˆ‹‡ƒǤ